[發(fā)明專利]布勞特菌AUH-JLD56及其在牛蒡苷元轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310368975.5
• 申請(qǐng)日: 2013-08-22
• 公開（公告）號(hào): CN103509741A
• 公開（公告）日: 2014-01-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王秀伶;劉明月;于秀梅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12P17/04;C12R1/01
• 代理公司: 石家莊國(guó)為知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所 13120
• 代理人: 米文智

1.一種布勞特菌（Blautia?sp.）AUH-JLD56，保藏號(hào)為CGMCC?No.8032。

2.根據(jù)權(quán)利要求１所述的布勞特菌AUH-JLD56在牛蒡苷元轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用，其特征在于包括下述步驟：

（1）菌株AUH-JLD56的培養(yǎng)；

（2）底物牛蒡苷元粗品與菌株AUH-JLD56共培養(yǎng)；

（3）代謝產(chǎn)物的分離純化。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的布勞特菌AUH-JLD56在牛蒡苷元轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用，其特征在于所述菌株AUH-JLD56的培養(yǎng)方法為：將低溫冷凍保存的菌株AUH-JLD56融化并按15-20%接種量接種到盛有新鮮BHI液體培養(yǎng)基的試管中，在厭氧工作站內(nèi)37℃下培養(yǎng)18-24小時(shí)；再以10-15%接種量將試管中的菌株AUH-JLD56重新轉(zhuǎn)接到盛有新鮮BHI液體培養(yǎng)基中，繼續(xù)在厭氧工作站內(nèi)培養(yǎng)18-24小時(shí)作為種子液。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的布勞特菌AUH-JLD56在牛蒡苷元轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用，其特征在于所述底物牛蒡苷元粗品與菌株AUH-JLD56共培養(yǎng)方法為：將菌株AUH-JLD56的種子液按10-15%接種量轉(zhuǎn)接到BHI液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，然后加入牛蒡苷元粗品，使得牛蒡苷元在培養(yǎng)基中的濃度不超過(guò)3.0毫摩爾/升,?在厭氧工作站內(nèi)培養(yǎng)2~3天，即可將底物牛蒡苷元粗品高效轉(zhuǎn)化為3′-去甲基-牛蒡苷元。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的布勞特菌AUH-JLD56在牛蒡苷元轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用，其特征在于所述牛蒡苷元粗品中底物牛蒡苷元濃度為150-250毫摩爾/升。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的布勞特菌AUH-JLD56在牛蒡苷元轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用，其特征在于所述代謝產(chǎn)物的分離純化方法為：用等體積的乙酸乙酯將三角瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)物萃取2次，萃取液過(guò)濾后蒸干，加入100%甲醇溶液，用制備柱在HPLC上進(jìn)行分離制備3′-去甲基-牛蒡苷元。