[發明專利]一種銀杏內酯C的分離純化方法

有效

• 申請號: 201310368286.4
• 申請日: 2013-08-21
• 公開（公告）號: CN103396421A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發明（設計）人: 肖志勇;于垂亮;周力軍;呂署一;蔣俊
• 申請（專利權）人: 上海信誼百路達藥業有限公司
• 主分類號: C07D493/20
• 分類號: C07D493/20
• 代理公司: 上海新天專利代理有限公司 31213
• 代理人: 王巍

1.一種銀杏內酯C的分離純化方法，其特征在于，該方法包括下列步驟：

（1）銀杏葉提取物用有機溶劑萃取得到萃取物；

（2）萃取物通過MCI-GEL?CHP系列吸附樹脂，先用0-20%的乙醇洗脫1-4BV除雜，再用20%-40%乙醇洗脫樹脂1-6BV，收集含銀杏內酯C的洗脫液；

（3）洗脫液減壓蒸干得銀杏內酯C粗品，回收溶劑，加入1/2-2倍粗品量的10%-90%乙醇，40℃-70℃加熱使粗品全部溶解后，過濾，濾液于2-10℃冷藏放置12-48h，析出結晶，反復結晶1-3次，用純化水洗結晶1-5次，于60℃-120℃真空加熱烘干，即得銀杏內酯C。

2.根據權利要求1所述一種銀杏內酯C的分離純化方法，其特征在于，所述步驟（1）銀杏葉提取物為市售，或通過下列方法制備：以銀杏干葉為原料，粉碎，用40%-80%乙醇水溶液提取，提取溶劑用量為藥材量的4-8倍V/W，提取次數為3-4次，每次提取時間為1-2小時，合并提取液，減壓濃縮回收乙醇至無乙醇味后，過濾，濾液上大孔吸附樹脂D101或HP20柱,柱體積為藥材量的1-1.5倍量V/W,水洗2-3BV去雜，60%-80%乙醇洗脫至洗脫液顏色變淡為止，減壓濃縮洗脫液即得銀杏葉提取物。

3.根據權利要求1所述一種銀杏內酯C的分離純化方法，其特征在于，所述步驟（1）有機溶劑選自乙酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酮、甲基乙基酮、正丁醇或異丁醇中的一種或兩種混合溶劑萃取，優選乙酸乙酯和丙酮，萃取次數為1-6次，優選3次，每次萃取所用溶劑用量為銀杏葉提取物5-15倍量V/W，優選10倍量V/W。

4.根據權利要求3所述一種銀杏內酯C的分離純化方法，其特征在于，所述步驟（1）有機溶劑選自乙酸乙酯或丙酮，萃取3次，每次萃取所用溶劑用量為銀杏葉提取物10倍量V/W。

5.根據權利要求1所述一種銀杏內酯C的分離純化方法，其特征在于，所述步驟（2）吸附樹脂填料為MCI-GEL?CHP系列反相吸附樹脂，其技術參數為：粒徑為75-150μm，平均粒徑為120μm，PH范圍為0-14，孔徑為450埃，基體為聚苯乙烯和二乙烯基共聚物；除雜溶劑為0-20%乙醇溶液，洗脫體積為1-4BV；洗脫溶劑為20%-40%乙醇,洗脫體積為1-6BV。

6.根據權利要求5所述一種銀杏內酯C的分離純化方法，其特征在于，所述步驟（2）所述MCI-GEL?CHP系列反相吸附樹脂為三菱化學株式會社生產，型號為CHP20/P120；除雜溶劑為10%乙醇溶液，洗脫體積為1-2BV；洗脫溶劑為30%乙醇，洗脫體積為2-3BV。

7.根據權利要求1所述一種銀杏內酯C的分離純化方法，其特征在于，

所述步驟（3）結晶溶劑為10-90%乙醇；重結晶步驟為反復重結晶1-3次；洗結晶步驟為用純化水洗結晶1-5次。

8.根據權利要求7所述一種銀杏內酯C的分離純化方法，其特征在于，

所述步驟（3）結晶溶劑為20%-50%乙醇；重結晶步驟為反復重結晶2次；洗結晶步驟為用純化水洗結晶3次。

9.根據權利要求1所述一種銀杏內酯C的分離純化方法，其特征在于，

所述步驟（3）結晶為：將MCI-GEL柱層析所得含銀杏內酯C流份于65℃以內和-0.09--0.1MPa條件下減壓旋蒸干至無溶劑，40℃-70℃加熱溶解于10%-90%乙醇中，趁熱過濾，濾液于2℃-10℃條件下放置12-48小時，析出結晶，過濾即得銀杏內酯C。

10.根據權利要求1所述一種銀杏內酯C的分離純化方法，其特征在于，步驟（3）結晶后得到的銀杏內酯C含量為98%-99%。