[發明專利]一種采用低滲透壓收獲液收獲病毒的方法有效
| 申請號： | 201310363119.0 | 申請日： | 2013-08-16 |
| 公開（公告）號： | CN103602639A | 公開（公告）日： | 2014-02-26 |
| 發明（設計）人： | 黃金鳳;張嵬;于巍;孟凡紅;何玉君;谷業新;高強;尹衛東 | 申請（專利權）人： | 科興（大連）疫苗技術有限公司 |
| 主分類號： | C12N7/02 | 分類號： | C12N7/02;A61K39/25;A61K39/15;A61K39/125;A61K39/29;A61P31/14;A61P31/22;C12R1/93 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 采用 滲透壓 收獲 病毒 方法 | ||
1.一種用于破碎細胞收獲病毒的低滲透壓收獲液，其特征在于，該低滲收獲液的滲透壓為0～150mOsmol/kg。
2.根據權利要求1所述的低滲透壓收獲液，其特征在于，含有磷酸二氫鹽和磷酸氫二鹽或在此基礎上添加的氯化鈉和/或蔗糖。
3.根據權利要求2所述的低滲透壓收獲液，其特征在于，含有如下組分：0.0026%-0.052%的磷酸二氫鹽、0.029%-0.58%的磷酸氫二鹽、0-0.34%的氯化鈉和0-1%的蔗糖，前述%均為質量體積比,單位為g/ml。
4.根據權利要求2所述的低滲透壓收獲液，其特征在于，含有如下組分：0.0052%-0.026%的磷酸二氫鹽，0.058%-0.290%的磷酸氫二鹽，0-0.170%的氯化鈉和0-1%的蔗糖；前述%均為質量體積比,單位為g/ml。
5.根據權利要求2所述的低滲透壓收獲液，其特征在于，含有如下組分：0.026%的磷酸二氫鹽，0.290%的磷酸氫二鹽，0%的氯化鈉和0%的蔗糖，前述%均為質量體積比,單位為g/ml。
6.根據權利要求1所述的低滲透壓收獲液，其特征在于，為稀釋后的細胞培養基或細胞緩沖液PBS。
7.根據權利要求6所述的低滲透壓收獲液，其特征在于，所述細胞培養基為MEM培養基、199培養基或無酚紅培養基。
8.一種采用低滲透壓收獲液收獲病毒的方法，其特征在于，包括如下步驟：
（1）在病毒培養環境中，當細胞出現病變CPE程度大于50%時，棄去細胞培養液，加入權利要求1-7任一所述的低滲透壓收獲液，室溫靜置5-30min；
（2）顯微鏡下觀察細胞狀態，待細胞發生明顯膨脹時震搖使細胞脫落，收集病毒液。
9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述的病毒為胞內病毒。
10.權利要求1-7任一所述的低滲透壓收獲液在制備用于預防或治療水痘病毒、輪狀病毒、EV71病毒、CA16病毒或甲肝病毒所致疾病的疫苗或藥物中的應用。
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