[發明專利]核酸和檢測轉基因水稻EB7001S及其衍生系的方法以及試劑盒及其用途

在審

• 申請號: 201310362525.5
• 申請日: 2013-08-19
• 公開（公告）號: CN104419708A
• 公開（公告）日: 2015-03-18
• 發明（設計）人: 肖國櫻;魏歲軍;鄧力華
• 申請（專利權）人: 中國科學院亞熱帶農業生態研究所
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C12Q1/68
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 李婉婉;王崇

1.一種核酸，該核酸為轉基因水稻EB7001S的旁側序列的核酸，所述轉基因水稻EB7001S的旁側序列為SEQ?ID?No.1或SEQ?ID?No.1的片段，SEQ?ID?No.6或SEQ?ID?No.6的片段；其中，SEQ?ID?No.1的片段至少包括SEQ?ID?No.1的第149-190位的序列，優選至少包括SEQ?ID?No.1的第139-200位的序列，更優選至少包括SEQ?ID?No.1的第129-210位的序列；SEQ?ID?No.6的片段至少包括SEQ?ID?No.6的第1889-1930位的序列，優選至少包括SEQ?ID?No.6的第1879-1940位的序列，更優選至少包括SEQ?ID?No.6的第1869-1950位的序列。

2.一種檢測轉基因水稻的方法，該轉基因水稻為轉基因水稻EB7001S或者含有權利要求1所述的核酸的轉基因水稻EB7001S的衍生水稻，該方法包括：

（1）使用針對權利要求1所述的核酸的特異性引物對，對取自待測水稻的核酸樣品進行PCR擴增，得到PCR擴增后的產物；

（2）檢驗所述PCR擴增后的產物中是否含有所述特異性引物對擴增產生的特異性目的片段；如果所述PCR擴增后的產物中含有所述特異性目的片段，則指示所述待測水稻為所述轉基因水稻EB7001S或者含有權利要求1所述的核酸的衍生系。

3.根據權利要求2所述的方法，其中，所述特異性引物對包括針對SEQ?ID?No.1或SEQ?ID?No.1的片段的特異性引物對，該引物對中的一條引物在SEQ?ID?No.1的1-169bp區域設計、另一條引物在SEQ?ID?No.1的170-2071bp區域設計；所述特異性引物對包括SEQ?ID?No.9所示的核酸和SEQ?ID?No.10所示的核酸；所述特異性引物對擴增產生的目的片段的長度為485bp。

4.根據權利要求3所述的方法，其中，PCR擴增的條件包括，退火溫度為56-61℃。

5.根據權利要求2所述的方法，其中，所述特異性引物對包括針對SEQ?ID?No.6或SEQ?ID?No.6的片段的特異性引物對，該引物對中的一條引物在SEQ?ID?No.6的1-1909bp區域設計、另一條引物在1910-2671bp區域設計；所述特異性引物對包括SEQ?ID?No.11所示的核酸和SEQ?ID?No.12所示的核酸；所述特異性引物對擴增產生的目的片段的長度為629bp。

6.根據權利要求5所述的方法，其中，PCR擴增的條件包括，退火溫度為52-62℃。

7.一種試劑盒，該試劑盒包括右側特異性引物對和/或左側特異性引物對，其中，所述右側特異性引物對包括SEQ?ID?No.9所示的核酸和SEQ?ID?No.10所示的核酸；所述左側特異性引物對包括SEQ?ID?No.11所示的核酸和SEQ?ID?No.12所示的核酸。

8.根據權利要求7所述的試劑盒，其中，所述試劑盒還包括陽性對照核酸，所述陽性對照核酸包括SEQ?ID?No.1所示的核酸和/或SEQ?ID?No.6所示的核酸。

9.根據權利要求7或8所述的試劑盒，其中，所述試劑盒還包括dNTPs、PCR緩沖液和耐高溫DNA聚合酶。

10.權利要求7-9中任意一項所述的試劑盒在檢測轉基因水稻EB7001S或者含有權利要求1所述的核酸的轉基因水稻EB7001S的衍生系中的用途。