[發(fā)明專利]磷脂酶C及其產(chǎn)生菌株

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310362007.3
• 申請日: 2013-08-19
• 公開（公告）號: CN104419651B
• 公開（公告）日: 2018-12-25
• 發(fā)明（設計）人: 周美鳳;徐正軍;許駿
• 申請（專利權）人: 豐益（上海）生物技術研發(fā)中心有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/16;C11B3/00;A23L33/17;A23K20/189;A61K38/46;C12R1/125
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 王潔

本發(fā)明提供了一種分離的表達磷脂酶C的菌株，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC No.7506。利用本發(fā)明所提供菌株和制備方法制備所得的磷脂酶C可以用于油脂精煉，脫膠效果良好，可以廣泛應用于油脂精煉、添加劑、醫(yī)藥等領域。

技術領域

本發(fā)明屬于酶脫膠領域，具體說是一種磷脂酶C及其產(chǎn)生菌株。

背景技術

磷脂酶（Phospholipase，PL)是生物體內(nèi)存在的能水解甘油磷脂的酶，水解產(chǎn)物為各種磷脂酸和氨基醇，如膽胺、膽堿、絲氨酸、乙醇胺等。根據(jù)磷脂酶水解甘油磷脂的位點不同，可將磷脂酶分為磷脂酶A(Phospholipase A，PLA)、磷脂酶B(Phospholipase B，PLB)、磷脂酶C(Phospholipase C，PLC)和磷脂酶D（Phospholipase D，PLD)，如圖1所示。

磷脂酶可廣泛應用于油脂精練、磷脂改性、飼料改良劑、食品工業(yè)和醫(yī)藥等方面。脫膠是植物油精煉過程中的一個重要環(huán)節(jié)，對提高油的品質(zhì)至關重要，脫膠主要是脫除磷脂，脫膠若不徹底，會影響油品的深加工和油品的穩(wěn)定性，減低油品貨架期。酶法脫膠可以克服傳統(tǒng)脫膠方法脫膠脫除率低，同時中性油損失高等的問題。而在酶法脫膠工藝中，現(xiàn)有文獻多報道磷脂酶PLA用于植物油脫膠。磷脂酶PLA(包括PLA1和PLA2)，脫膠后可產(chǎn)生極性溶血磷脂和極性脂肪酸，PLA脫膠工藝僅僅損失油中總的磷脂分子，來減少精煉損耗。而磷脂酶PLC酶通過選擇性水解磷酸酯官能團與磷脂反應，生成甘油二酯（DAG）和磷脂酸基團，甘油二酯不需要被除去，所以PLC脫膠工藝通過保留原始的磷脂分子而僅去除磷酸酯官能團來減少精煉損耗，不存在PLA脫膠工藝中產(chǎn)生的能提高脫膠油酸價的極性脂肪酸的問題，PLC用于脫膠優(yōu)勢明顯好于PLA。

磷脂酶C（PLC）可來源于動物和微生物。文獻報道磷脂酶C細菌來源的有：粘質(zhì)沙雷氏菌武漢株(Serratia marcescens wuhan strain)、假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)、產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌(Clostridum perfringens)、諾氏梭狀芽孢桿菌(Closrtidium novyi)、雙酶梭狀芽孢桿菌(clostridium bifermantans)、洋蔥假單胞菌(Pseudomonas cepacia)、金黃色葡萄球菌(staphylococcus aureus)、蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)、蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis)、類鼻疽伯克氏菌（burkholderia pseudomallei）。磷脂酶C霉菌來源的有：煙曲霉(Aspergillusfumigates)、黃曲霉(Aspergillus flavus)、自佐氏曲霉菌(Aspergillus saitoi)。磷脂酶C酵母來源的有白色念珠菌(canidia Albicans)。JP50-1017183報道斯谷假單胞菌（Pseudomonas schuylkilliensis）可以產(chǎn)磷脂酶C。JP49-55893報道來源于streptomyceshachijyoensis的磷脂酶C。

磷脂酶C的芽孢桿菌來源相關報道中，蠟樣芽孢桿菌和蘇云金芽孢桿菌來源的PLC的相關文獻和專利報道的比較多，并未有來源于枯草芽孢桿菌的磷脂酶C的相關報道。US6284517公開了蠟樣芽孢桿菌和蘇云金芽孢桿菌有磷脂酶C活性。JP55034039報道蘇云金芽孢桿菌（Bacillus thuringiensis）可以產(chǎn)磷脂酶C。US3909360報道蠟樣芽孢桿菌產(chǎn)磷脂酶A和磷脂酶C。

蠟樣芽孢桿菌和蘇云金芽孢桿菌是引起水源和食物等污染的常見菌，蠟樣芽孢桿菌可厭氧生長、有運動性、該菌呈長桿狀，寬度大于1微米。而有報道的真菌煙曲霉和黃曲霉來源的磷脂酶C，煙曲霉和黃曲霉也是公認的致病菌，無法在食品工業(yè)中使用。