[發明專利]一種PK15細胞制備豬圓環Ⅱ型病毒疫苗的培養基及其使用方法在審
申請號: | 201310361844.4 | 申請日: | 2013-08-13 |
公開(公告)號: | CN103409364A | 公開(公告)日: | 2013-11-27 |
發明(設計)人: | 賈馨丹 | 申請(專利權)人: | 江蘇太一生物科技有限公司 |
主分類號: | C12N5/071 | 分類號: | C12N5/071;C12N7/02;A61K39/12;A61P31/20 |
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地址: | 214135 江蘇省無錫*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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摘要: | |||
搜索關鍵詞: | 一種 pk15 細胞 制備 圓環 病毒 疫苗 培養基 及其 使用方法 | ||
1.一種大規模高密度培養PK15細胞制備豬圓環II型病毒疫苗的培養基,其特征在于,培養基的組成成分及重量份為:
2.如權利要求1所述的大規模高密度培養PK15細胞制備豬圓環II型病毒疫苗的培養基,其特征在于,上述培養基的組成成分及重量份優選為:
3.如權利要求1或2所述的培養基,在使用前加入1%-2%的胎牛血清或小牛血清,經過膜過濾制成在大規模高密度環境下使用的培養PK15細胞的培養液。
4.一種大規模高密度培養得到PK15細胞接入豬圓環II型病毒后,維持病毒感染時期的培養基,其特征在于,培養基的組成成分及重量份為:
5.如權利要求4所述的培養基,其特征在于,上述培養基的組成成分及重量份優選為:
6.如權利要求4或5所述的培養基,其特征在于,上述培養基還包含如下成分及其重量比例:
7.如權利要求6所述的培養基,其特征在于,上述培養基包含的添加成分,其重量份的優選比例為:
8.一種大規模高密度培養PK15細胞制備豬圓環II型病毒疫苗的培養方法,其特征在于,使用權利要求1-3所述的培養基,在生物反應器中以灌流培養的方式大規模高密度的培養PK15細胞;使用權利要求4-7所述的培養基,接種豬圓環II型病毒種毒液,以灌流培養的方式維持豬圓環II型病毒的增殖,直到收獲病毒液。
9.如權利要求8所述的方法,其特征在于,使用本方法所述的培養基和低濃度的血清,在生物反應器中大規模高密度的培養PK15細胞;在接種豬圓環II型病毒后,使用本方法所述的無血清、低蛋白的培養基維持病毒增殖。
10.如權利要求9所述的方法,其特征還在于,適用于制備針對各種豬圓環II型病毒株,各種宿主的豬圓環II型病毒滅活疫苗。
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