[發明專利]一種提高靈敏度和特異性的定量PCR方法有效
| 申請號： | 201310361195.8 | 申請日： | 2013-08-19 |
| 公開（公告）號： | CN103409540A | 公開（公告）日： | 2013-11-27 |
| 發明（設計）人： | 蔣國成;陳旭;陳剛;吳小祝 | 申請（專利權）人： | 蘇州吉泰生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙) 31262 | 代理人： | 巫蓓麗 |
| 地址： | 215434 江蘇省蘇州*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 提高 靈敏度 特異性 定量 pcr 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種提高靈敏度和特異性的定量PCR方法，其特征在于，在PCR反應體系中加入熒光染料Gelgreen?I和熱啟動hTaq酶，所述的熒光染料Gelgreen?I能特異性地結合DNA雙鏈而發出熒光信號。
2.根據權利要求1所述的定量PCR方法，其特征在于，所述的熒光染料Gelgreen?I的工作濃度為0.5×～1×，所述熱啟動hTaq酶的工作濃度為0.01～0.1U/μL。
3.根據權利要求1所述的定量PCR方法，其特征在于，所述的PCR反應體系還包括PCR緩沖液、dATP溶液、dUTP溶液、dGTP溶液、dCTP溶液、PCR保護劑、鎂離子和無菌雙蒸水。
4.根據權利要求1所述的定量PCR方法，其特征在于，所述的PCR反應體系還包括PCR緩沖液、正向引物、反向引物、dATP溶液、dUTP溶液、dGTP溶液、dCTP溶液、PCR保護劑、鎂離子和無菌雙蒸水。
5.根據權利要求3或4所述的定量PCR方法，其特征在于，所述的dATP溶液、dUTP溶液、dGTP溶液或dCTP溶液的工作濃度為100～200μmol/L。
6.根據權利要求3或4所述的定量PCR方法，其特征在于，所述的PCR保護劑是小牛血清白蛋白、明膠、Tween?20或二硫蘇糖醇。
7.根據權利要求6所述的定量PCR方法，其特征在于，所述的PCR保護劑是小牛血清白蛋白。
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