[發(fā)明專利]一種預(yù)處理方法及環(huán)丙沙星和紅霉素的檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310360283.6
• 申請(qǐng)日: 2013-08-16
• 公開（公告）號(hào): CN103399108A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王淵龍;任婧;劉景;陳臣;張紅發(fā);劉振民
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 光明乳業(yè)股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/06
• 分類號(hào): G01N30/06;G01N30/02
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 朱水平;余化鵬

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種預(yù)處理方法及環(huán)丙沙星和紅霉素的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

環(huán)丙沙星是畜牧業(yè)常用的獸藥之一，屬于喹諾酮類抗生素，是一類廣譜高效的抗菌藥。對(duì)革蘭陰性桿菌有高度抗菌活性，還對(duì)葡萄球菌屬、肺炎球菌、鏈球菌屬及部分分枝桿菌、沙眼衣原體、溶脲脲原體、人型支原體等都有抑制作用。

紅霉素為大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，抗菌譜與青霉素近似，對(duì)革蘭陽性菌，如葡萄球菌、化膿性鏈球菌、綠色鏈球菌、肺炎鏈球菌、糞鏈球菌、溶血性鏈球菌、梭狀芽孢桿菌、白喉?xiàng)U菌、炭疽桿菌等有較強(qiáng)的抑制作用。特點(diǎn)是對(duì)青霉素產(chǎn)生耐藥性的菌株，對(duì)該抗生素敏感，是畜牧業(yè)中常用的獸藥之一。

牛奶是一種大眾日常的消費(fèi)品，隨著人們對(duì)食品安全要求日益提高，牛奶的安全質(zhì)量問題也越來越為人們重視。但從我國(guó)國(guó)內(nèi)養(yǎng)殖環(huán)境來看，在我國(guó)大部分地區(qū)，特別是廣大農(nóng)村地區(qū)的動(dòng)物和飼料生產(chǎn)過程中仍存超量、超范圍使用抗生素，不嚴(yán)格執(zhí)行藥物配伍禁忌和停藥期規(guī)定，甚至使用違禁抗生素等現(xiàn)象。從乳制品加工的角度來看，原料乳中抗生素殘留物嚴(yán)重干擾發(fā)酵乳制品的生產(chǎn)，抗生素殘留可嚴(yán)重影響干酪、黃油、發(fā)酵乳的起酵和后期風(fēng)味的形成。

原料乳或者液態(tài)乳制品中環(huán)丙沙星和紅霉素殘余量的檢測(cè)方法主要有高效液相色譜法（HPLC）和液相色譜-質(zhì)譜（HPLC-MS/MS）法等；其前處理多采用液液萃取和固相萃取等方法。但是這些前處理方法操作步驟多，耗時(shí)長(zhǎng)，有機(jī)溶劑使用量大。分散固相萃取快速前處理法，是2003年由美國(guó)農(nóng)業(yè)部開發(fā)的快速前處理技術(shù)，方法快速、簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、可靠，應(yīng)用于果蔬糧谷樣本中農(nóng)藥殘留檢測(cè)，但是沒有將此方法應(yīng)用于處理高蛋白和高脂肪的復(fù)雜基質(zhì)中，也未見應(yīng)用于原料乳或者不含添加物的液態(tài)乳制品中環(huán)丙沙星和紅霉素抗生素殘余量的分析。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是為了克服現(xiàn)有的檢測(cè)方法的預(yù)處理方法操作步驟多，耗時(shí)長(zhǎng)，有機(jī)溶劑使用量大的缺陷，提供一種新的預(yù)處理方法及環(huán)丙沙星和紅霉素的檢測(cè)方法。該預(yù)處理方法能顯著提高預(yù)處理效率，方法快速、簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、可靠，能去除了基質(zhì)影響，有效地提取出目標(biāo)測(cè)量物，有益于待測(cè)樣品的快速檢測(cè)；同時(shí)，節(jié)約有機(jī)溶劑的使用，有利于環(huán)保；提取工藝簡(jiǎn)單，在保持較高提取效率同時(shí)減少有機(jī)溶劑的排放和損失，節(jié)約能耗，具有較強(qiáng)的應(yīng)用價(jià)值。

本發(fā)明的目的之一是，提供一種預(yù)處理方法，所述的預(yù)處理方法包括以下步驟：

（1）將待測(cè)樣品、乙腈和無機(jī)鹽A混合，震蕩，離心，收集上清液；所述的無機(jī)鹽A為無水硫酸鎂、無水硫酸鈉、無水碳酸鈉、無水醋酸鈉和氯化鈉中的一種或多種；所述的待測(cè)樣品為原料乳和/或液態(tài)乳制品；

（2）將步驟（1）中的上清液、C18填料和無機(jī)鹽B混合，渦旋并離心，收集上清液，過濾，即可；所述的無機(jī)鹽B為無水硫酸鈉和/或無水硫酸鎂，所述的C18填料的添加量為5-50mg/mL待測(cè)樣品。

步驟（1）中，所述的待測(cè)樣品較佳的為可能含有環(huán)丙沙星和/或紅霉素的原料乳和/或液態(tài)乳制品。較佳的，所述的液態(tài)乳制品為不含有固體顆粒的液態(tài)乳制品。所述的原料乳為本領(lǐng)域常規(guī)的原料乳，較佳的，所述的原料乳的成分及其含量如表1所示。

表1牛乳的成分及其含量（單位：%）