[發明專利]一種山梔子酮苷的制備方法

無效

• 申請號: 201310360107.2
• 申請日: 2013-08-19
• 公開（公告）號: CN103420992A
• 公開（公告）日: 2013-12-04
• 發明（設計）人: 張金芳;萬冬梅
• 申請（專利權）人: 南京標科生物科技有限公司
• 主分類號: C07D407/12
• 分類號: C07D407/12
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于生物技術領域，特別涉及一種梔子酮苷的制備方法。

背景技術

梔子酮苷屬于環烯醚萜糖苷類物質，CAS號54835-76-6，分子式C16H22O10，分子量374.35，分子結構式：

?山梔子又叫黃梔子、山梔、白蟾，是茜草科植物梔子的果實，含黃酮類梔子素、果膠、鞣質、藏紅花素、藏紅花酸、D-甘露醇、廿九烷、β-谷甾醇，梔子苷、梔子酮苷及山梔苷B等成分，具有瀉火除煩、清熱利濕、涼血解毒的功效，用于治療心腦血管、肝膽等疾病。

通過文獻檢索，現有梔子酮苷的制備方法，多采用硅膠柱分離。此類方法存在操作復雜，收率低的技術缺陷。

發明內容

本發明的目的是解決現有技術不足和缺陷，提供一種操作簡便的山梔子苷B的制備方法。

本發明的目的是這樣來實現的：一種梔子酮苷的制備方法，其特征在于在于以下步驟：

1）將鮮山梔子原料打漿，加入3-10倍量95%乙醇充分攪拌，沉淀，抽濾上清液，濾渣再加入95%乙醇溶液充分攪拌，合并兩次提取液回收乙醇，濃縮液加入適量水稀釋后加入超濾膜超濾，透過液再加入大孔樹脂柱吸附，乙醇溶液梯度洗脫，洗脫液用納濾膜納濾，收集濃縮液；

???2）上述濃縮液加入水飽和正丁醇萃取，收集萃取液減壓濃縮，濃縮液采用高速逆流色譜分離，根據圖譜收集流分，流分減壓干燥即得。

????所述步驟1）中的超濾膜可選截留分子量3000-6000的中空纖維素膜，納濾膜為截留分子量為300的中空纖維素膜。

?????所述步驟1）中的大孔樹脂型號可選HZ816、ADS-21、NK-9和NK-II中一種。

?????所述步驟1）中的乙醇溶液梯度洗脫為：先用3-5倍柱體積20-40%乙醇溶液洗脫，再用5-10倍量60-80%乙醇溶液洗脫。

?所述步驟2）高速逆流色譜分離條件為：溶劑系統選乙酸乙酯、正丁醇、水，混合比例1-7:2-5:4-9，取上相做固定相，下相做流動相，主機轉速700-1000rpm，流速1-3ml/min。

采用本發明制備梔子酮苷，方法操作簡單，污染小，能耗低，易于工業化生產。

具體實施方式：

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

實施例1：

取20kg鮮山梔子原料打漿，加入10倍量95%乙醇充分攪拌，沉淀，抽濾上清液，濾渣再加入5倍量95%乙醇溶液充分攪拌，合并兩次提取液回收乙醇，濃縮液加入水稀釋后加入截留分子量3000的中空纖維素膜超濾，透過液加HZ816大孔樹脂吸附，先用5倍柱體積20%乙醇溶液洗脫，再10倍量60%乙醇溶液洗脫，洗脫液再加入截留分子量為300的中空纖維素膜納濾，收集濃縮液加入等體積水飽和正丁醇溶液萃取2次，萃取液濃縮成浸膏。取乙酸乙酯、正丁醇、水，按比例1:2:4混合，取上相注入色譜管做固定相，主機轉速800rpm，取下相做流動相，流速3ml/min，根據圖譜收集流分，流分減壓干燥得白色梔子酮苷B3.2g，經HPLC檢測，含量98.4%。

實施例2：

取20kg鮮山梔子原料打漿，加入8倍量95%乙醇充分攪拌，沉淀，抽濾上清液，濾渣再加入7倍量95%乙醇溶液充分攪拌，合并兩次提取液回收乙醇，濃縮液加入水稀釋后加入截留分子量3000的中空纖維素膜超濾，透過液加ADS-21大孔樹脂吸附，先用5倍柱體積30%乙醇溶液洗脫，再8倍量70%乙醇溶液洗脫，洗脫液再加入截留分子量為300的中空纖維素膜納濾，收集濃縮液加入等體積水飽和正丁醇溶液萃取3次，萃取液濃縮成浸膏。取乙酸乙酯、正丁醇、水，按比例2:3:6混合，取上相注入色譜管做固定相，主機轉速900rpm，取下相做流動相，流速2ml/min，根據圖譜收集流分，流分減壓干燥得白色梔子酮苷B4.1g，經HPLC檢測，含量96.5%。

實施例3：