[發明專利]一種二次接種分段固態發酵生產發酵豆粕的方法

有效

• 申請號: 201310359106.6
• 申請日: 2013-08-16
• 公開（公告）號: CN103478417A
• 公開（公告）日: 2014-01-01
• 發明（設計）人: 孔秀
• 申請（專利權）人: 寧波中瑞生物科技有限公司;寧波市特圣生物飼料有限公司
• 主分類號: A23K1/14
• 分類號: A23K1/14;C12N1/20;C12N1/16;C12R1/125;C12R1/225;C12R1/72
• 代理公司: 上海申新律師事務所 31272
• 代理人: 竺路玲

技術領域

本發明涉及一種發酵方法，尤其涉及一種二次接種分段固態發酵生產發酵豆粕的方法以及發酵產物。

背景技術

由于目前飼料中添加抗生素的現象十分普遍，出于安全原因，許多國家禁止利用一些畜產品下腳料生產的肉骨粉等動物蛋白原料用于飼料，因此，從安全與成本角度考慮，將植物源蛋白作為動物蛋白原料的替代品已經成為一種趨勢。但是，要高效利用植物源蛋白，需要解決影響消化吸收的抗營養因子、適口性等問題；同時在幼禽畜養殖防治下痢中，抗生素的使用嚴重威脅了我們的食品安全，因此，在飼料生產中，需要采用在功能上能夠替代不良副作用添加劑的微生態添加劑產品。

發酵豆粕作為優質的生物發酵蛋白原料，在動物飼料中可部分或完全替代動物蛋白原料，且具有來源豐富、質量穩定、易保存和無動物源性飼料疫病傳染的風險等特點，在動物飼料生產中已被廣泛應用。例如CN20090916A公開了一種高效發酵劑進行豆粕發酵的工藝，高效豆粕發酵劑由枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、乳酸乳桿菌、釀酒酵母和產朊假絲酵母混合而成，將豆粕和玉米粉碎，菌種活化，將粉碎好的豆粕與發酵液用混合機混合均勻，將混合好的豆粕發酵裝袋，進行發酵。該工藝消除或顯著降低了豆粕中的抗營養因子的含量，能滿足幼年動物健康成長，營養平衡，質優價廉的安全植物性蛋白飼料，能替代骨粉、魚粉等動物性蛋自飼料。

然而傳統固態發酵復合菌固態發酵過程中，多菌種同時接種無法同時滿足不同菌發酵要求，造成發酵不徹底。多菌種組合固態整體發酵的關鍵控制點在于把握和控制好好氧與厭氧二個階段，掌握好好氧向厭氧的轉換。

發明內容

本發明的目的在于克服上述不足，提供一種二次接種分段固態發酵生產發酵豆粕的方法，通過二次接種分時段發酵，滿足好氧菌與厭氧菌的不同需求，發酵徹底。

本發明的第一個方面是提供一種二次接種分段固態發酵生產發酵豆粕的方法，包括以下步驟：

步驟1，將枯草芽孢桿菌液、假絲酵母菌液和乳酸桿菌液混合得到混合菌液；

步驟2，將混合菌液接入到去皮豆粕，混合，通風發酵；

步驟3，將乳酸桿菌液接入到步驟2處理得到的發酵物中，混合，厭氧發酵，得到發酵豆粕。

步驟1得到混合菌液中枯草芽孢桿菌、假絲酵母菌、乳酸桿菌的比例優選為（1-5）:（1-5）:1，更優選為（2-3）:（2-3）:1，更優選為（2.2-2.8）:（2.2-2.8）:1，更優選為（2.4-2.6）:（2.4-2.6）:1。

步驟2中，混合菌液接入到去皮豆粕中的接種量為體積百分比0.5-15%，更優選為1-10%，更優選為1-5%，更優選2-4%。

步驟2中，發酵時間優選為10-40h，更優選為15-30h，更優選為18-25h，更優選為20-22h。

步驟3中，乳酸桿菌液接入到步驟2處理得到的發酵物中的接種量為體積百分比0.1-10%，更優選為0.5-8%，更優選為1-6%，更優選為1.5-4%，例如2%、2.5%、3%或3.5%。

步驟3中，厭氧發酵時間優選為為30-100h，更優選為35-80h，更優選為40-65h，更優選為45-50h，更優選為48-50h。

在本發明第一個方面的一個優選的實施例中，采用鏈帶式發酵床進行發酵。

優選地，步驟2為：將混合菌液與去皮豆粕混合得到發酵基礎料，將發酵基礎料按10-50cm（優選20-45cm，更優選30-40cm）的厚度均勻攤鋪在獨立封閉的發酵床，起始溫度控制在15-45℃（優選20-38℃，更優選20-30℃，更優選20-25℃），起始pH值為6.0-7.0（優選6.5-7.0），在鏈帶式發酵床的第一層通風發酵。

優選地，步驟3為：將鏈帶式發酵床由第一層發到第二層的同時，將乳酸桿菌液均勻噴灑在步驟2處理得到的發酵物上，厭氧發酵25-60h（優選30-45h，更優選36-38h）后，再將發酵物由第二層翻到第三層，繼續厭氧發酵。

優選地，步驟3中鏈帶式發酵床的第二層和第三層與周圍環境隔離，通過枯草芽孢桿菌和假絲酵母菌的發酵將環境調節到適合乳酸桿菌生長的條件。

所述枯草芽孢桿菌液制備優選為：將枯草芽孢桿菌保存菌種接種到NB培養基中，活化培養8-30h（更優選10-25h，更優選12-20h，更優選14-18h），將活化培養物以0.5-10%（更優選0.8-8%，更優選1-5%，更優選2-4%）的接種量接種于種子罐中，培養10-40h（更優選12-35h，更優選14-30h，更優選16-20h），得到枯草芽孢桿菌液。