[發(fā)明專利]一種酵母表達重組蛋白發(fā)酵液的固液分離方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310357544.9
• 申請日: 2013-08-15
• 公開（公告）號: CN104370999A
• 公開（公告）日: 2015-02-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 梁光軍;項煒;孫九如;李冬
• 申請（專利權(quán)）人: 上海萬特醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C07K1/36
• 分類號: C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K14/765
• 代理公司: 上海專利商標事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

1.一種酵母表達重組蛋白發(fā)酵液的固液分離方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)在發(fā)酵液中加入沉淀劑和助凝劑進行前處理；和

(2)將經(jīng)過步驟(1)處理的發(fā)酵液加入到膜過濾系統(tǒng)中，分離獲得發(fā)酵上清液。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的沉淀劑包括：氯化鋁、硫酸鋁鉀、硅酸鈉、硫酸鐵、聚丙烯酸鈉或硅藻土；和/或

所述的助凝劑包括：聚丙烯酰胺。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，所述的硅酸鈉、氯化鋁或硫酸鋁鉀的終濃度按照質(zhì)量體積比為0.01-10%；較佳地為0.2-2%；更佳地為0.5%。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，所述的聚丙烯酰胺的終濃度按照質(zhì)量體積比為0.01-1%；較佳地為0.03-0.5%；更佳地為0.05%。

5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的膜過濾系統(tǒng)包括：陶瓷膜或聚偏氟乙烯膜。

6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述的陶瓷膜孔徑為0.05-0.5微米；較佳地為0.08-0.2微米；更佳地為0.1微米。

7.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述的聚偏氟乙烯膜截留分子量大小為30-300KD；較佳地為80-130KD；更佳地為100KD；或

述的聚偏氟乙烯膜孔徑為0.05-0.2μm；較佳地0.08-0.15μm；更佳地0.1μm。

8.如權(quán)利要求1-7任一所述的方法，其特征在于，沉淀劑和助凝劑進行前處理的方法包括：先加入沉淀劑攪拌；再加入助凝劑攪拌5-20分鐘；靜置20分鐘以上。

9.如權(quán)利要求1-7任一所述的方法，其特征在于，所述的酵母包括：畢赤酵母或釀酒酵母；

所述的重組蛋白包括：血清白蛋白。

10.如權(quán)利要求1-7任一所述的方法，其特征在于，所述的固液分離方法是大規(guī)模固液分離方法，每次處理的發(fā)酵液的量高于100公斤；較佳地高于150公斤；更佳地高于199公斤。