[發明專利]一種人血白蛋白的制備工藝

有效

• 申請號: 201310355272.9
• 申請日: 2013-08-15
• 公開（公告）號: CN103394076A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發明（設計）人: 梁小明;徐建新;廖昕晰;何淑琴;鄧志華;黃璠
• 申請（專利權）人: 江西博雅生物制藥股份有限公司
• 主分類號: A61K38/38
• 分類號: A61K38/38;A61K9/08;A61P7/08;C07K14/765;C07K1/30
• 代理公司: 南昌新天下專利商標代理有限公司 36115
• 代理人: 施秀瑾

1.一種人血白蛋白的制備工藝，采用低溫乙醇分離法，以人血漿為原料，分別進行血漿溶解；組分I制作；組分II+III制作；組分IV制作；組分V制作；組分V精制；超濾；稀配；巴氏滅活；蛋白除菌分裝；制品孵育；成品包裝；其特征在于：?所述組分II+III制作、組分IV制作、組分V制作和組分V精制中采用壓濾技術替代傳統的離心技術進行固液分離，控制進液壓力最高不超過0.20Mpa；白蛋白收率>29g/L血漿，純度>98%。

2.?根據權利要求1所述的一種人血白蛋白的制備工藝，其特征在于：所述組分V精制中采用Zetaplus深層濾芯過濾，提高對內毒素和病毒的脫除能力，吸附制品中帶負電的凝血因子XIIa，降低人血白蛋白制品中的激肽釋放酶原激活劑PKA含量。

3.根據權利要求1或2所述的一種人血白蛋白的制備工藝，其特征在于：所述超濾中采用超濾技術將組分V純化液濃縮至蛋白含量為15%以上，通過使用2種梯度濃度的氯化鈉溶液超濾，控制制品中的乙醇殘留量≤0.025%，鋁殘留量<50μg/L。

4.根據權利要求1或2所述的一種人血白蛋白的制備工藝，其特征在于：所述組分II+III制作：取組分I?上清液，加pH4.0緩沖液調節組分I上清液的pH值為6.80—6.85，控制流速不超過1.0升/分鐘；添加低于－15℃的95％乙醇至乙醇體積比濃度為20％，流速為1.0—1.2升/分鐘，溫度控制在－4—－6℃；加完乙醇后，pH為6.80—7.00；攪拌120分鐘以上后，靜置60分鐘以上，再開啟攪拌，按每升反應液加入17—19g硅藻土，進行壓濾，進液壓力最高不超過0.20Mpa，壓濾后得組分Ⅱ+Ⅲ沉淀和組分Ⅱ+Ⅲ上清液；組分Ⅱ+Ⅲ沉淀用于制備免疫球蛋白，組分Ⅱ+Ⅲ上清液進入下一步工序。

5.根據權利要求1或2所述的一種人血白蛋白的制備工藝，其特征在于：所述組分IV制作：取組分Ⅱ+Ⅲ上清液，加pH4.0緩沖液調節組分Ⅱ+Ⅲ上清液的pH值為5.70—5.90，控制流速不超過1.0升/分鐘，溫度控制在－4—－6℃；添加低于－15℃的95％乙醇至乙醇體積比濃度為40％，流速為1.0—1.2升/分鐘；加完乙醇后，pH為5.90—6.10；攪拌120分鐘以上后，靜置60分鐘以上，再開啟攪拌，按每升反應液加入14—16g硅藻土，進行壓濾，進液壓力最高不超過0.20Mpa，壓濾后得組分IV沉淀和組分IV上清液；組分IV沉淀廢棄，組分IV上清液進入下一步工序。

6.根據權利要求1或2所述的一種人血白蛋白的制備工藝，其特征在于：所述組分V制作：取組分IV上清液，加pH4.0緩沖液調節組分IV上清液的pH值為4.80—5.00，控制流速不超過1.0升/分鐘，溫度控制在－8℃以下，攪拌120分鐘以上后，再按每升反應液加入3.5—4.5g硅藻土，進行壓濾，進液壓力最高不超過0.20Mpa，壓濾后得組分V沉淀和組分V上清液；組分V上清液轉移至酒精回收塔回收酒精，組分V沉淀進入下一步工序。

7.根據權利要求1或2所述的一種人血白蛋白的制備工藝，其特征在于：所述組分V精制：取組分V沉淀用4.8—5.2倍注射用水充分溶解，加pH4.0緩沖液調節組分V沉淀溶解液的pH值為4.50—4.60，控制流速不超過1.0升/分鐘；添加低于－15℃的25％乙醇至乙醇體積比濃度為10％，流速為1.0—1.2升/分鐘，溫度控制在－2—－3℃；攪拌120分鐘以上后，再按每升反應液加入18—22g硅藻土，進行壓濾，進液壓力最高不超過0.20Mpa；濾液用Zetaplus深層濾芯過濾，得到組分V純化液，過濾過程中，進液壓力最高不超過0.20Mpa。

8.根據權利要求3所述的一種人血白蛋白的制備工藝，其特征在于：所述超濾：超濾過程中控制進液壓不大于0.45Mpa，回流壓不大于0.30Mpa，進液壓與回流壓壓差大于0.10Mpa；將組分V純化液濃縮至蛋白含量為15%以上，濃縮結束后，依次用4倍體積的2—8℃的0.85%氯化鈉溶液和5倍體積的2—8℃的0.5%氯化鈉溶液進行等體積透析；透析結束后，將蛋白濃度濃縮至20%以上；使用1mol/L?NaHCO₃調節蛋白液的pH值至6.90—7.10。