[發明專利]用于制備棉花胚性愈傷組織的培養基、試劑盒及其用途

無效

• 申請號: 201310354195.5
• 申請日: 2013-08-14
• 公開（公告）號: CN103387954A
• 公開（公告）日: 2013-11-13
• 發明（設計）人: 陳全家;曲延英;阿依夏木姑麗·司馬依力;孫國清
• 申請（專利權）人: 新疆農業大學
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04;A01H4/00;A01H5/00
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 李志東

1.一組用于制備棉花胚性愈傷組織的培養基，其特征在于，包含：

愈傷組織誘導培養基，所述愈傷組織誘導培養基為添加了0.1mg/L?KT、0.05mg/L2,4-D和1.5g/L?gelrite的MSB培養基；

胚性愈傷組織誘導培養基，所述胚性愈傷組織誘導培養基為添加了1.9g/L?KNO₃和2.0g/L?gelrite的MSB培養基；以及

胚性愈傷組織增殖培養基，所述胚性愈傷組織增殖培養基為添加了1.9g/L?KNO₃、0.1g/L天冬酰胺、0.1g/L谷氨酰胺和1.8g/L?gelrite的MSB培養基，

任選地，所述棉花為陸地棉。

2.一種用于制備棉花胚性愈傷組織的試劑盒，其特征在于，包含權利要求1所述的一組培養基，

任選地，所述棉花為陸地棉。

3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述愈傷組織誘導培養基、所述胚性愈傷組織誘導培養基和所述胚性愈傷組織增殖培養基分別設置在不同的容器中。

4.權利要求1所述的培養基，或者權利要求2或3所述的試劑盒在制備棉花胚性愈傷組織中的用途，

任選地，所述棉花為陸地棉。

5.一種制備棉花胚性愈傷組織的方法，其特征在于，包括以下步驟：

利用愈傷組織誘導培養基對棉花無菌苗的下胚軸進行培養，以便獲得愈傷組織；

利用胚性愈傷組織誘導培養基對所述愈傷組織進行培養，以便獲得初性胚性愈傷組織；以及

利用胚性愈傷組織增殖培養基對所述初性胚性愈傷組織進行培養，以便使所述初性胚性愈傷組織增殖，獲得胚性愈傷組織，

其中，

所述愈傷組織誘導培養基為添加了0.1mg/L?KT、0.05mg/L2,4-D和1.5g/L?gelrite的MSB培養基，

所述胚性愈傷組織誘導培養基為添加了1.9g/L?KNO₃和2.0g/L?gelrite的MSB培養基，

所述胚性愈傷組織增殖培養基為添加了1.9g/L?KN0₃、0.1g/L天冬酰胺、0.1g/L谷氨酰胺和1.8g/L?gelrite的MSB培養基，

任選地，所述棉花為陸地棉。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，

對所述棉花無菌苗的下胚軸進行培養時，每隔25～30天繼代一次；

對所述愈傷組織進行培養時，每隔25～30天繼代一次；

對所述初性胚性愈傷組織進行培養時，每隔30天繼代一次。

7.一種制備棉花再生植株的方法，其特征在于，包括以下步驟：

根據權利要求5或6所述的制備棉花胚性愈傷組織的方法，制備棉花胚性愈傷組織；

利用分化培養基對所述棉花胚性愈傷組織進行培養，以便使所述棉花胚性愈傷組織分化形成子葉胚；

利用成苗培養基對所述子葉胚進行培養，以便獲得再生苗；以及

將所述再生苗嫁接于棉花實生苗上，以便獲得所述棉花再生植株，

其中，

所述分化培養基為去除NH₄NO₃并添加了1.9g/L?KNO₃、0.1g/L天門冬酰胺、0.1g/L谷氨酰胺和2.0g/L?gelrite的MSB培養基，

所述成苗培養基為添加了2.0g/L?gelrite的MSB培養基，

任選地，所述棉花為陸地棉。

8.一種制備轉基因棉花植株的方法，其特征在于，包括以下步驟：

根據權利要求5或6所述的制備棉花胚性愈傷組織的方法，制備棉花胚性愈傷組織；以及

利用農桿菌介導法，對所述棉花胚性愈傷組織進行基因轉化，以便獲得轉基因棉花植株，

任選地，所述棉花為陸地棉。