[發(fā)明專利]用于制備棉花胚性愈傷組織的培養(yǎng)基、試劑盒及其用途

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310354195.5
• 申請(qǐng)日: 2013-08-14
• 公開（公告）號(hào): CN103387954A
• 公開（公告）日: 2013-11-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳全家;曲延英;阿依夏木姑麗·司馬依力;孫國清
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N5/04
• 分類號(hào): C12N5/04;A01H4/00;A01H5/00
• 代理公司: 北京清亦華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11201
• 代理人: 李志東

1.一組用于制備棉花胚性愈傷組織的培養(yǎng)基，其特征在于，包含：

愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基，所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基為添加了0.1mg/L?KT、0.05mg/L2,4-D和1.5g/L?gelrite的MSB培養(yǎng)基；

胚性愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基，所述胚性愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基為添加了1.9g/L?KNO₃和2.0g/L?gelrite的MSB培養(yǎng)基；以及

胚性愈傷組織增殖培養(yǎng)基，所述胚性愈傷組織增殖培養(yǎng)基為添加了1.9g/L?KNO₃、0.1g/L天冬酰胺、0.1g/L谷氨酰胺和1.8g/L?gelrite的MSB培養(yǎng)基，

任選地，所述棉花為陸地棉。

2.一種用于制備棉花胚性愈傷組織的試劑盒，其特征在于，包含權(quán)利要求1所述的一組培養(yǎng)基，

任選地，所述棉花為陸地棉。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基、所述胚性愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基和所述胚性愈傷組織增殖培養(yǎng)基分別設(shè)置在不同的容器中。

4.權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，或者權(quán)利要求2或3所述的試劑盒在制備棉花胚性愈傷組織中的用途，

任選地，所述棉花為陸地棉。

5.一種制備棉花胚性愈傷組織的方法，其特征在于，包括以下步驟：

利用愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基對(duì)棉花無菌苗的下胚軸進(jìn)行培養(yǎng)，以便獲得愈傷組織；

利用胚性愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基對(duì)所述愈傷組織進(jìn)行培養(yǎng)，以便獲得初性胚性愈傷組織；以及

利用胚性愈傷組織增殖培養(yǎng)基對(duì)所述初性胚性愈傷組織進(jìn)行培養(yǎng)，以便使所述初性胚性愈傷組織增殖，獲得胚性愈傷組織，

其中，

所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基為添加了0.1mg/L?KT、0.05mg/L2,4-D和1.5g/L?gelrite的MSB培養(yǎng)基，

所述胚性愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基為添加了1.9g/L?KNO₃和2.0g/L?gelrite的MSB培養(yǎng)基，

所述胚性愈傷組織增殖培養(yǎng)基為添加了1.9g/L?KN0₃、0.1g/L天冬酰胺、0.1g/L谷氨酰胺和1.8g/L?gelrite的MSB培養(yǎng)基，

任選地，所述棉花為陸地棉。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，

對(duì)所述棉花無菌苗的下胚軸進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，每隔25～30天繼代一次；

對(duì)所述愈傷組織進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，每隔25～30天繼代一次；

對(duì)所述初性胚性愈傷組織進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，每隔30天繼代一次。

7.一種制備棉花再生植株的方法，其特征在于，包括以下步驟：

根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的制備棉花胚性愈傷組織的方法，制備棉花胚性愈傷組織；

利用分化培養(yǎng)基對(duì)所述棉花胚性愈傷組織進(jìn)行培養(yǎng)，以便使所述棉花胚性愈傷組織分化形成子葉胚；

利用成苗培養(yǎng)基對(duì)所述子葉胚進(jìn)行培養(yǎng)，以便獲得再生苗；以及

將所述再生苗嫁接于棉花實(shí)生苗上，以便獲得所述棉花再生植株，

其中，

所述分化培養(yǎng)基為去除NH₄NO₃并添加了1.9g/L?KNO₃、0.1g/L天門冬酰胺、0.1g/L谷氨酰胺和2.0g/L?gelrite的MSB培養(yǎng)基，

所述成苗培養(yǎng)基為添加了2.0g/L?gelrite的MSB培養(yǎng)基，

任選地，所述棉花為陸地棉。

8.一種制備轉(zhuǎn)基因棉花植株的方法，其特征在于，包括以下步驟：

根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的制備棉花胚性愈傷組織的方法，制備棉花胚性愈傷組織；以及

利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法，對(duì)所述棉花胚性愈傷組織進(jìn)行基因轉(zhuǎn)化，以便獲得轉(zhuǎn)基因棉花植株，

任選地，所述棉花為陸地棉。