[發明專利]一種烏飯樹組織培養的方法

有效

• 申請號: 201310353850.5
• 申請日: 2013-08-14
• 公開（公告）號: CN103404440A
• 公開（公告）日: 2013-11-27
• 發明（設計）人: 李峰;鄧艷;高秋榮;田力;許超
• 申請（專利權）人: 江蘇九久環境科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

技術領域

本發明屬于植物栽培領域，涉及植物組織培養，尤其涉及一種烏飯樹組織培養的方法。

背景技術

烏飯樹又名南燭，屬杜鵑花科常綠灌木。多分布于我國南方地區，因人們有每年陰歷三月初三和四月初八用其葉蒸烏飯食用而得名。烏飯樹樹形蒼古遒勁，根干灰褐色帶紅，姿態優美，古拙典雅，是不可多得的制作盆景的優良素材；用烏飯樹樹葉制作的烏米飯具有補益脾腎，止咳、安神、明目、烏發的功效。因人們每年采食烏飯樹樹葉，外加開荒毀壞山體，導致烏飯樹野生資源瀕臨滅絕。張法良報道了烏飯樹種子萌發的方法，使其播種繁殖成為可能。但是，由于野生烏飯樹所結果實較少，且較難采摘，故通過播種繁殖也較難實現大規模的發展。

植物的組織培養是根據植物細胞具有“全能性”的理論，于近年來發展起來的一項無性繁殖的新技術。植物的組織培養廣義又叫離體培養，指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細胞、原生質體等，通過無菌操作，在人工控制條件下進行培養以獲得再生的完整植株或生產具有經濟價值的其他產品的技術。狹義則是指用植物各部分組織，如形成層、薄壁組織、葉肉組織、胚乳等進行培養獲得再生植株，也指在培養過程中從各器官上產生愈傷組織的培養，愈傷組織再經過再分化形成再生植物。植物的組織培養具有：（1）占用空間小、不受地區、季節限制；（2）培養周期短、可短時間大量繁殖；（3）不存在變異、可保持原母本的一切遺傳特征；（4）培養脫毒作物；（5）投資少，經濟效益高等眾多優點，正逐漸成為多種植物培育的新方式。但是作為食用及盆景的烏飯樹，目前尚未見有關用植物的組織培養方法進行培育報道。

發明內容

本發明的目的在于針對烏飯樹繁殖困難的難題，提供一種擴繁率高、生長速率快的烏飯樹組織培養的方法。

為實現本發明的目的，本發明采用以下技術方案：

一種烏飯樹組織培養的方法，包括（1）外植體消毒、（2）誘導培養、（3）增殖培養、（4）生根培養四個步驟。

所述步驟（1）的具體步驟為：

①取烏飯樹當年生帶腋芽的枝條并除去葉片后作為外植體，在洗滌液中浸

泡；

優選地，所述洗滌液為濃度為0.5wt%～2wt%（例如0.6wt%、0.8wt%、1.2wt%、1.5wt%或1.9wt%）的洗衣粉的水溶液，優選1wt%的洗衣粉的水溶液；

優選地，所述浸泡的時間為5～30min（例如6min、9min、12min、16min、22min或28min），優選10～20min，更優選15min；

②刷洗后于流水下沖洗；

優選地，所述沖洗的時間為1～5h（例如1.5h、2.1h、3h、4.5h或4.9h），優選2～4h，更優選3h；

③在超凈工作臺上，先放入酒精中浸泡，再用無菌水沖洗；

優選地，所述酒精是70wt%的酒精；

優選地，所述酒精中浸泡的時間為20～80s（例如25s、35s、45s、55s、65s或70s），優選30～60s，更優選40～50s；

優選地，所述無菌水沖洗的次數為2～8次（例如3次、4次、5次、6次、7次或8次），優選2-6次，更優選3～5次；

④升汞消毒后再用無菌水沖洗；

優選地，所述升汞是0.1wt%的升汞；

優選地，所述升汞消毒的時間是5～20min（例如6min、9min、11min、13min、15min、17min或19min），優選10～15min；

優選地，所述無菌水沖洗的次數是2～10次（例如2次、3次、5次、7次、8次或9次）），優選4～8次，更優選5～7次；

⑤吸干表面水分，將莖段剪成帶l個腋芽的莖段；

優選地，所述莖段的長度是1～2cm。

所述步驟（2）的具體步驟為：

將步驟（1）處理過的莖段接種到誘導培養基中進行誘導培養，待新梢長出，進行下一步驟。

優選地，所述誘導培養基是添加了玉米素（ZT）、吲哚丁酸（IBA）和赤霉素（GA₃）的WPM培養基。

所述玉米素為一種天然的細胞分裂素，添加到培養基中能夠將氨基酸、生長素、無機鹽等營養成分向處理部位調運，具有抑制植物葉綠素、核酸、蛋白質的分解，保綠防老的功能。

所述吲哚丁酸為一種植物主根的生長促進劑，能夠促進細胞分裂與細胞生長，主要是加速根的生長，提高生根的百分率、發芽率以及成活率。

所述赤霉素為一種植物激素，可刺激葉和芽的生長及莖間的伸長。