[發(fā)明專利]一種同時檢測九種有機磷農藥的方法

有效

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• 申請日: 2013-08-14
• 公開（公告）號: CN103399099A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發(fā)明（設計）人: 徐志祥;王璽龍;趙濤
• 申請（專利權）人: 山東農業(yè)大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;B01J20/26;B01J20/30
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發(fā)明涉及一種同時檢測多種有機磷農藥的方法，屬于食品安全檢測技術領域。

背景技術

有機磷農藥因化學性質不穩(wěn)定，易分解，半衰期短，不易在作物、動物和人體內蓄積，因而得到廣泛使用。但由于有機磷使用范圍越來越廣，使用頻率越來越高，施用量越來越大，已成為污染食品最為嚴重的農藥[1]。大量有機磷農藥殘留超標不僅污染農產品和生態(tài)環(huán)境，還將危及人體健康和生命安全。長期食用有機磷農藥殘留微量超標的農產品，可能引起人的慢性中毒，導致疾病的發(fā)生，甚至影響下一代。食用有機磷農藥殘留嚴重的蔬菜或果品，輕者會出現頭痛、頭暈、惡心、腹痛等癥狀，重者會造成呼吸困難、痙攣、昏迷，更嚴重者甚至會威脅到人的生命安全。作為乙酰膽堿抑制劑，有機磷農藥的環(huán)境暴露和皮膚接觸也會引起生物中毒。

農藥多殘留檢測是國內外食品安全領域研究和發(fā)展的熱點，目前主要采用氣相色譜、液相色譜、免疫分析、氣相色譜-質譜(GC-MS)和液相色譜-質譜(LC-MS)等方法。色譜-質譜法檢測靈敏度高但價格昂貴。色譜法檢出限高（一般為10-500μg?kg^-1），不能滿足痕量農藥殘留和出口貿易檢測的實際需要(日本肯定列表對農藥殘留限量值為10μg?kg^-1)，因此在分析之前通常需要進行富集。目前采用的前處理方法主要有固相萃取、液-液萃取、基質分散固相萃取、固相微萃取、超臨界流體萃取和柱層析等。由于基質固相分散萃取具有樣品用量少、消耗有機溶劑少等優(yōu)點，基質固相分散萃取已被廣泛應用于環(huán)境、生物和食品中藥物、有機污染物和天然產物的分析。但基于商品化的基質固相分散萃取吸附劑往往選擇性較差，目標物與吸附劑之間的作用力是非特異性的，提取凈化的效率不高，很難徹底清除基質的干擾，且成本也較高。因此利用分子印跡技術合成對多種有機磷農藥具有特異識別能力的吸附功能材料作為基質固相分散萃取的吸附劑，并與氣相色譜聯用，使檢測過程簡單、快速且具有高的靈敏度，對保證我國食品中有機磷農藥的有效檢測和監(jiān)控監(jiān)管具有十分重要的意義。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于克服傳統的有機磷農藥檢測方法中存在的檢測時間長、儀器價格昂貴、前處理煩瑣等缺陷，提供了一種同時檢測九種有機磷農藥的方法，具體是利用分子印跡基質固相分散萃取與氣相色譜聯用同時檢測九種有機磷農藥（敵百蟲、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂果、久效磷、樂果、磷胺、甲基對硫磷、馬拉硫磷）的方法。

本發(fā)明通過以下步驟實現：

1）多識別位點分子印跡聚合物的制備：

10mmoL?4-氨基丁酸加入5-20mL?2.5mol?L^-1NaOH溶液，冰浴攪拌30min；然后逐滴加入1-2mL?o,o-二甲基硫代磷酰氯，調節(jié)pH值至10，室溫繼續(xù)攪拌6h。洗滌雜質調節(jié)pH至2.0，然后用乙酸乙酯萃取混合物。旋蒸，得到公共模板4-二甲氧基硫代磷酰氨基丁酸。

在乙腈溶液中，將4-二甲氧基硫代磷酰氨基丁酸、功能單體丙烯酰胺、交聯劑乙二醇二甲基丙烯酸酯以1:3:8的摩爾比例混合均勻，然后加入偶氮二異丁腈作為引發(fā)劑進行聚合反應；將獲得的聚合物磨碎后用甲醇/冰乙酸（9:1，v/v）連續(xù)萃取8h，再用100%甲醇萃取4h，干燥后得分子印跡聚合物。

2）分子印跡基質固相分散萃取-氣相色譜聯用體系的建立：

將添加有九種有機磷農藥標準溶液的樣品2-4g和0.5-1.0g步驟1）制備的分子印跡聚合物混合研磨使樣品完全分散于分子印跡聚合物中，將上述混合物填充到空的固相萃取柱中。先用30mL正己烷淋洗固相萃取柱，再用5mL的甲醇冰乙酸混合溶液（甲醇：冰乙酸=95:5v/v）洗脫，洗脫液氮吹后用0.2mL二氯甲烷復溶并過濾，取1μL的濾液進氣相色譜儀分析，建立標準曲線。

3）待測物中有機磷農藥含量的確定：

將待測樣品重復步驟2）操作，根據氣相色譜的峰面積由標準曲線分別計算出待測樣品中敵百蟲、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂果、久效磷、樂果、磷胺、甲基對硫磷、馬拉硫磷的含量。

本發(fā)明的有益效果：

1.本發(fā)明以制備的對多種有機磷農藥具有高選擇性的分子印跡聚合材料作為吸附劑，避免了傳統分子印跡聚合物識別單一等缺點，避免了樣品繁瑣的前處理過程。

2.本發(fā)明將分子印跡基質固相分散萃取技術與氣相色譜聯用建立對敵百蟲、甲胺磷等九種有機磷農藥具有高靈敏度的檢測方法，實現了同時對食品中的多種有機磷農藥進行檢測，大大縮短了分析時間，適用于農藥多殘留的快速檢測。