[發明專利]一種結球甘藍的單倍體植株培養方法

無效

• 申請號: 201310350474.4
• 申請日: 2013-08-13
• 公開（公告）號: CN103392603A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發明（設計）人: 張振超;潘躍平;戴忠良;毛忠良;吳國平;姚悅梅;秦文斌;肖燕;潘永飛;王建華;馬志虎;孫春青
• 申請（專利權）人: 鎮江瑞繁農藝有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

1.一種結球甘藍的單倍體植株培養方法，包括以下步驟：

（1）取結球甘藍的花蕾和小麥子房，滅菌；

（2）將滅菌后的花蕾配制成小孢子懸浮液，將所述小孢子懸浮液和小麥子房置于培養液中混合培養，誘導獲得子葉型胚狀體；

（3）將子葉型胚狀體接入分化培養基中，培養獲得再生植株；

（4）從再生植株切取再生芽，接入生根培養基，獲得完整植株。

2.根據權利要求1所述結球甘藍的單倍體植株培養方法，其特征在于，所述花蕾與小麥子房的數量比為1：4～8。

3.根據權利要求1所述結球甘藍的單倍體植株培養方法，其特征在于，所述結球甘藍的花蕾為處于單核晚期至雙核早期的結球甘藍花蕾；所述小麥子房取自受精前2～3天的小麥麥穗。

4.根據權利要求3所述結球甘藍的單倍體植株培養方法，其特征在于，所述結球甘藍花蕾的花瓣和花藥長度比為0.7～1.2：1；花蕾滅菌后置于無菌NLN-13液體培養基中預培養1～3天。

5.根據權利要求1所述結球甘藍的單倍體植株培養方法，其特征在于，所述培養液為NLN-13液體培養基和無菌活性炭混合液的混合物。

6.根據權利要求5所述結球甘藍的單倍體植株培養方法，其特征在于，所述活性炭混合液的組成為：1L?NLN液體培養基、2～5g瓊脂糖和1g活性炭。

7.根據權利要求6所述結球甘藍的單倍體植株培養方法，其特征在于，所述培養液中活性炭混合液與NLN-13液體培養基的體積比為1:80。

8.根據權利要求1所述結球甘藍的單倍體植株培養方法，其特征在于，所述小孢子懸浮液與小麥子房混合后先在33℃、黑暗條件下恒溫培養2天，再在25℃、黑暗條件下恒溫培養10～15天至肉眼可見細胞團出現，最后在25℃、黑暗條件下50～60rpm振蕩培養10～15天，得到子葉型胚狀體。

9.根據權利要求1所述結球甘藍的單倍體植株培養方法，其特征在于，所述生根培養基由1/2MS培養基1L+0.1～0.2mg?NAA+0.1～0.2mgIBA、20～30g蔗糖或白砂糖和7～8g瓊脂組成，pH5.8～6.0。