[發明專利]液態乳中乳糖含量的測定方法

在審

• 申請號: 201310346715.8
• 申請日: 2013-08-09
• 公開（公告）號: CN103398962A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發明（設計）人: 劉景;任婧;張紅發;王淵龍;趙威
• 申請（專利權）人: 光明乳業股份有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N1/28;G01N1/38;G01N1/44
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 朱水平;余化鵬

1.一種液態乳中乳糖的測定方法，其特征在于：所述的測定方法包括以下步驟：

（1）將液態乳、氫氧化鋇溶液和硫酸鋅溶液混合均勻，在2000G-2500G的速度下離心2min-5min，得上清液；其中，所述的液態乳、所述的氫氧化鋇溶液中的氫氧化鋇和所述的硫酸鋅溶液中的硫酸鋅的質量比為（1：0.1：0.4）-（1：0.15：0.8）；

（2）將步驟（1）中得到的上清液與發色劑混合均勻，經標準曲線法測定，即可；所述的發色劑為苯酚溶液、氫氧化鈉溶液、2，4，6-三硝基苯酚溶液和硫酸氫鈉溶液；所述的苯酚溶液中的苯酚、氫氧化鈉溶液中的氫氧化鈉、2，4，6-三硝基苯酚溶液中的2，4，6-三硝基苯酚、硫酸氫鈉溶液中的硫酸氫鈉和所述的液態乳的質量比為（1：10：2：1：3）-（1：10：2：1：1.5）。

2.如權利要求1所述的測定方法，其特征在于：所述的液態乳為生乳、滅菌乳和巴氏殺菌乳中的一種或多種。

3.如權利要求1所述的測定方法，其特征在于：步驟（1）中，所述的液態乳、所述的氫氧化鋇溶液中的氫氧化鋇和所述的硫酸鋅溶液中的硫酸鋅的質量比較佳的為（1：0.1：0.4）-（1：0.14：0.56）。

4.如權利要求1所述的測定方法，其特征在于：步驟（1）中，所述的離心的速度為2000G；所述的離心的時間為3min-5min，更佳的為3min。

5.如權利要求1所述的測定方法，其特征在于：步驟（1）中，所述的氫氧化鋇溶液的濃度為2.5%-3.75%，較佳的為2.5%-3.75%，更佳的為2.5%，所述百分比為質量百分比；

步驟（1）中，所述的硫酸鋅溶液的濃度為2.5%-5%，較佳的為2.5%-3.75%，更佳的為2.5%，所述百分比為質量百分比。

6.如權利要求1所述的測定方法，其特征在于：步驟（2）中，所述的標準曲線法測定的方法包括以下步驟：用乳糖標準品配制乳糖標準工作液待用，取六份體積為V1-V6的乳糖標準工作液，測定吸光度，記作A1-A6，六份體積為V1-V6的乳糖標準工作液中含乳糖標準品的量分別為M1-M6，M1-M6的值均不等；根據M1-M6和A1-A6繪制標準曲線，再在相同的測量條件下，測量待測乳糖樣品的吸光度，根據待測乳糖樣品的吸光度和標準曲線計算待測乳糖樣品的質量，并計算其含量。

7.如權利要求1所述的測定方法，其特征在于：步驟（2）中，所述的苯酚溶液的濃度為1%-2%，較佳的為1%，所述百分比為質量百分比；

步驟（2）中，所述的氫氧化鈉溶液的濃度為5%-10%，較佳的為5%，所述百分比為質量百分比；

步驟（2）中，所述的2，4，6-三硝基苯酚溶液的濃度為1%-2%，較佳的為1%，所述百分比為質量百分比；

步驟（2）中，所述的硫酸氫鈉溶液的濃度為1%-2%，較佳的為1%，所述百分比為質量百分比。

8.如權利要求1所述的測定方法，其特征在于：步驟（1）中，所述的混合均勻后，水浴加熱，并冷卻至15℃-25℃。

9.如權利要求8所述的測定方法，其特征在于：所述的水浴加熱為沸水浴加熱；所述的水浴加熱的時間為6min；所述的冷卻的時間為1min-3min，較佳的為3min。

10.如權利要求6所述的測定方法，其特征在于：所述的吸光度的測定使用紫外分光光度計進行；所述的吸光度的測定波長為515nm-524nm，較佳的為520nm；

所述的乳糖標準樣品的純度≥99.5%；使用前，乳糖標準樣品在70℃真空烘箱中烘至恒重；所述的乳糖標準工作液的濃度為1mg/mL。