[發(fā)明專利]一種臺(tái)灣含笑的無(wú)性繁殖方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310344978.5
• 申請(qǐng)日: 2013-08-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103392517A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-11-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王宜森;薛峰;竇逗;楊積衛(wèi)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京金埔園林股份有限公司
• 主分類號(hào): A01G1/06
• 分類號(hào): A01G1/06;A01H4/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種臺(tái)灣含笑的無(wú)性繁殖方法，其特征在于所述方法包括如下步驟：步驟A，臺(tái)灣含笑實(shí)生苗的培育；步驟B，臺(tái)灣含笑接穗預(yù)處理；步驟C，嫁接方法；以及步驟D，嫁接后管理。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟A臺(tái)灣含笑實(shí)生苗的培育具體為：

(1)外植體選取與消毒：6月份，選取當(dāng)年生頂稍作為外植體進(jìn)行消毒；

(2)改良WPM培養(yǎng)基的制備：用KNO₃200mg/L代替原WPM培養(yǎng)基中的K₂SO₄，另外添加活性炭的濃度為1000mg/L，其他組分均無(wú)變化；

(3)不定芽的誘導(dǎo)：取步驟(1)中經(jīng)消毒后的外植體，切割為0.8cm長(zhǎng)的莖段，每莖段帶一腋芽，接種于不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行不定芽的誘導(dǎo)，培養(yǎng)溫度為20-26℃，首先在黑暗中培養(yǎng)12小時(shí)，然后光照培養(yǎng)20-25天，所述不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為步驟(2)制備的改良WPM培養(yǎng)基，添加的激素水平為：

KT-30?1mg/L+玉米素0.8mg/L+6-BA0.1mg/L+GA₃0.5mg/L；

(4)高壓靜電場(chǎng)HVEF處理：利用高壓靜電場(chǎng)儀器，對(duì)不定芽進(jìn)行靜電場(chǎng)處理，強(qiáng)度為10KV/cm，時(shí)間0.5小時(shí)；

(5)繼代增殖：將經(jīng)高壓靜電場(chǎng)處理的不定芽接入繼代增殖培養(yǎng)基，進(jìn)行繼代培養(yǎng)20-30天得到無(wú)根試管苗，培養(yǎng)溫度為20-26℃，繼代增殖培養(yǎng)基為步驟(2)制備的改良WPM培養(yǎng)基，并添加玉米素0.2mg/L+KT-300.2mg/L+IBA0.1mg/L；

(6)生根培養(yǎng)：將步驟(5)獲得的臺(tái)灣含笑無(wú)根試管苗接入生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)20-30天，培養(yǎng)溫度為20-26℃，生根培養(yǎng)基為步驟(2)制備的改良WPM培養(yǎng)基，并添加IBA3.0mg/L；

步驟B臺(tái)灣含笑接穗預(yù)處理具體為：

將步驟A獲得的臺(tái)灣含笑實(shí)生苗枝條上切口平切、下切口斜切，長(zhǎng)度為5cm左右，保留1～2個(gè)飽滿芽，然后用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑浸泡枝條下部10min，取出枝條，再用1％DMSO浸泡枝條下部10min；所述植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的制備方法為：按照重量份取吲哚丁酸7份、胺鮮酯5份、赤霉素3份、KT-30?1份，維生素B1?1份，抗壞血酸1份，混合均勻，得到混合物，以200mg混合物∶1L水的稀釋比例添加水，配制得到植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑；

步驟C嫁接方法為：嫁接時(shí)間選取在3月份，采用切接的方法，將預(yù)處理后的接穗插入砧木，使接穗與砧木的形成層對(duì)齊后用無(wú)滴膜將接口自下而上嚴(yán)密纏繞包扎；所述砧木為鵝掌楸。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，步驟(1)中消毒的具體步驟為：

用毛刷蘸少許洗衣粉將外植體表面刷洗干凈，接著用自來(lái)水沖洗30分鐘，隨后用稀釋50倍的84消毒液搖床上振蕩消毒10分鐘，然后流水沖洗3分鐘后，于無(wú)菌操作臺(tái)上用75％乙醇消毒50-60秒，立即倒入0.1％的升汞中消毒10分鐘，最后用無(wú)菌水洗滌3次，每次振蕩3-5分鐘。