[發(fā)明專利]一種九節(jié)定的提取方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310344142.5
• 申請日: 2013-08-09
• 公開（公告）號: CN103435633A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發(fā)明（設計）人: 張金芳;萬冬梅
• 申請（專利權）人: 南京標科生物科技有限公司
• 主分類號: C07D519/00
• 分類號: C07D519/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發(fā)明屬于中藥提取分離技術領域，特別涉及一種九節(jié)定的提取方法。

背景技術

九節(jié)定（Psychotridine），是一種吲哚類生物堿，mp.180-181℃，分子式為C₅₅H₆₂N₁₀，分子量為863.17，結構式為：

九節(jié)定主要存在于茜草科(Rubiaceae)?植物福斯特九節(jié)木Psychotria?forsteriana?A.Gray的葉中。藥理研究表明，九節(jié)定具有抗血小板聚集，為ADP、膠原或凝血酶誘導的人型血小板聚集的有效抑制劑，其有效劑量范圍為1-10μM，作用于血小板活化的后期；具有細胞毒活性，對大鼠肝細胞瘤HTC株有較高的細胞毒作用(強于長春新堿)，對人型白血病也有細胞毒作用。

經文獻檢索，尚未發(fā)現九節(jié)定的工業(yè)化提取純化方法的相關報道。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于提供一種九節(jié)定的提取方法。

本發(fā)明是通過以下技術方案加以實現的：

（1）將福特斯九節(jié)木的葉粉碎，加0.4-0.7%鹽酸或硫酸水溶液浸泡3-5h，超聲處理30-60min，過濾得到提取液；

（2）提取液上陽離子交換樹脂柱，先用去離子水洗至中性，再用堿性醇溶液洗脫，洗脫液減壓濃縮；

（3）濃縮液調節(jié)pH至10-11，用氯仿萃取，取有機層，回收氯仿，干燥得到粗品；

（4）以正丁醇-丙醇-水為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜儀分離粗品中的九節(jié)定，收集目標成分，濃縮干燥得到九節(jié)定粗晶；

（5）粗晶采用制備型液相色譜分離，紫外在線檢測，收集目標成分，低溫干燥即得九節(jié)定純品。

步驟（2）中所述陽離子交換樹脂可選D151、HZD-2或HD-8中的一種。

步驟（2）中所述堿性醇溶液為pH9-11的乙醇水溶液，其中乙醇的體積百分比濃度為80%。

步驟（4）中所述溶劑系統(tǒng)正丁醇-丙醇-pH8.5氨水的體積比為（6-8）:（1-2）:（8-11），下相為固定相，上相為流動相。

步驟（5）中所述制備液相的流動相為甲醇-0.15%氨水溶液，體積比為70:30，紫外檢測波長為243nm。

本發(fā)明的有益效果是：

（1）本發(fā)明采用酸水浸提，可有效減少雜質的溶出，采用超聲處理，提取時間短、提率高；

（2）高速逆流色譜和制備型液相色譜結合進行分離純化，分離效果好，產品純度高，可實現工業(yè)自動化生產。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發(fā)明進行說明。

實施例1：

將福特斯九節(jié)木的干燥根粉碎，取2kg，加0.4%鹽酸水溶液浸泡4h，超聲處理40min，過濾得到的提取液上HZD-2陽離子交換樹脂，先用去離子水洗至中性，再用8LpH10的80%乙醇溶液洗脫，洗脫液減壓濃縮，調pH至11，用氯仿萃取，取氯仿層，回收氯仿干燥得到粗品；取正丁醇、丙醇、pH8.5氨水，按體積比為7:2:10混合，靜置，分出上下相，以下相為固定相，上相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，調節(jié)轉速調節(jié)850rpm，取上相溶解粗品注入色譜儀，控制流動相流速為2ml/min，收集九節(jié)定流分，濃縮、干燥得粗晶；用95%乙醇溶解，配成濃度為25mg/ml的溶液，經0.45μm微濾膜過濾，得到樣品溶液，以C8鍵合相為柱填料，粒徑為10μm，柱長為15cm、直徑為4cm，六通閥進樣，進樣體積為25ml，以甲醇-0.15%氨水溶液為流動相，體積比為70:30，控制流速為30ml/min，紫外在線檢測，檢測波長為243nm，收集目標成分，低溫干燥，得到純度為98.1%的九節(jié)定。

實施例2：