[發明專利]一種金錢松內酯B的制備方法

無效

• 申請號: 201310341289.9
• 申請日: 2013-08-07
• 公開（公告）號: CN103421076A
• 公開（公告）日: 2013-12-04
• 發明（設計）人: 張金芳;萬冬梅
• 申請（專利權）人: 南京標科生物科技有限公司
• 主分類號: C07J71/00
• 分類號: C07J71/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，公開了一種金錢松內酯B的制備方法。

背景技術

金錢松內酯B（Pseudolarolide??B），為三萜類化合物，mp.171-173℃，分子式為C₃₀H₄₂O₄，分子量為466.66，分子結構為：

金錢松內酯B來源于松科(Pinaceae)金錢松Pseudolarix?kaempferi?Gord.的種子。現代研究表明，金錢松內酯B具有細胞毒活性。對三種人癌細胞KB(鼻咽癌)、A-549(肺癌)、HCT-8(結腸癌)和白血病細胞P388的ED50分別為0.49μg/ml、0.67μg/ml、0.73μg/ml和0.79μg/ml?。

現有技術中，尚沒有金錢松內酯B工業化生產工藝的披露。

發明內容

本發明的目的是提供一種金錢松內酯B的制備方法，具體來說，是采用大孔樹脂和液相結合的方法制備竹節香附素。

本發明所述的一種金錢松內酯B的制備方法，其特征在于包含以下步驟：

（1）提取：將金錢松的種子粉碎，加入8-10倍（V/W）藥材重量的甲醇溶液，置于超聲提取設備中超聲提取2-3次，過濾，得到提取液；

（2）萃取：提取液減壓濃縮回收甲醇，用乙酸乙酯萃取，棄去乙酸乙酯萃取液，得到水層；

（3）柱層析：將水層上大孔樹脂柱吸附，甲醇-水洗脫，分步收集，合并金錢松內酯B流分，低溫濃縮至有沉淀析出，得到濃縮液；

（4）純化：濃縮液靜置過夜，濾出沉淀，將沉淀物溶于流動相中，超聲溶解，用半制備型液相色譜儀純化，收集目標流分，低溫濃縮，干燥得到金錢松內酯B。

步驟（1）中所述甲醇溶液濃度為75-90%。

步驟（1）中所述超聲提取功率為50-80KHz，提取2次，每次0.5h。

步驟（3）中所述大孔樹脂為HPD300、HPD450、NKA-9型大孔樹脂，甲醇-水體積比為22:5。

步驟（3）和步驟（4）中所述低溫為5-10℃。

步驟（4）中所述半制備型高效液相色譜儀填料為：ODS?C18，5μm，250*46mm。

步驟（4）中所述流動相為甲醇-水（65:35），流速10.0ml/min，檢測波長為?208nm。

本發明的積極效果為：本發明制備的金錢松內酯B純度高、具有較強的抗艾滋病毒活性，原料豐富易得，應用前景廣闊。

分析型高效液相色譜條件：ODS?C18，5μm，250*4.5mm(I.D.)，流動相為甲醇：水（75:25），流速1.0ml/min，柱溫：室溫；檢測波長：UV?208nm；進樣量：10微升。????

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式：

實施例1：

將金錢松的種子粉碎，取3kg，加入8倍（V/W）藥材重量的90%甲醇溶液，置于超聲提取設備中超聲提取，提取功率為50KHz，提取2次，每次0.5h，過濾，得到提取液，減壓濃縮回收甲醇，用乙酸乙酯萃取，棄去乙酸乙酯萃取液，得到水層，上NKA-9型大孔樹脂柱吸附，甲醇-水22:5洗脫，分步收集，合并金錢松內酯B流分，在5℃溫度下低溫濃縮至有沉淀析出，得到濃縮液，靜置過夜，濾出沉淀；以甲醇-水（65:35）為流動相，色譜條件：ODS?C18，5μm，250*46mm(I.D.)，流動相流速10.0ml/min，柱溫：室溫，檢測波長：UV?208nm，進樣量：18ml，用半制備型液相色譜儀純化，將沉淀物溶于流動相中，超聲溶解，進樣，收集目標流分，在10℃溫度下低溫濃縮，干燥得到金錢松內酯B，含量97.2%。

實施例2：