[發明專利]一種乳酸乳球菌干粉的制備方法

無效

• 申請號: 201310320990.2
• 申請日: 2013-07-23
• 公開（公告）號: CN103396962A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發明（設計）人: 張衛兵;牛鵬;高維東;劉興龍;楊敏;李曉鵬;宋雪梅
• 申請（專利權）人: 甘肅農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/04;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于生物工程技術領域，涉及一種乳酸乳球菌干粉的制備方法。

背景技術

生產發酵乳制品最重要的要素是發酵過程中使用的乳酸菌菌種，只有好的乳酸菌菌種才能生產出優質的發酵乳制品。青藏高原牧區具有非常特殊的地理生態環境，海拔高、晝夜溫差大。當地牧民采用千百年來沿襲古老而傳統的方法制作牦牛酸奶，將新鮮的牦牛乳加熱煮沸，冷卻后接種上次制作預留的酸奶(接種量一般是3％～5％)，在室內放置(10～25℃)至凝乳，屬于典型的低溫發酵。在長期的自然進化過程中，牦牛乳酸奶中傳代性好、抗逆性強、凝乳狀態好、風味獨特、低溫發酵的的優良乳酸菌得到富集。

前期我們采用改良M17培養基分離得到的一株乳酸乳球菌1-3-5(Lactococcus?lactis?subsp.Lactis，保藏號CGMCC?NO.4776)。該菌株在本申請人2011.8.3提交的CN102321550A專利申請中已經提交微生物保藏。目前國內乳酸菌發酵劑大多采用國外菌株。本發明所涉及一種乳酸乳球菌干粉的制備方法，具有方法簡單、易操作、活菌數高等優點，生產的乳酸乳球菌干粉適合應用于發酵乳制品加工。

發明內容

本發明的目的是提供一種乳酸乳球菌干粉的制備方法。本發明涉及一種乳酸乳球菌干粉的制備方法。本發明的目的是按如下技術方案實現的，其特征是它包括以下步驟：

(1)菌種活化：將冷凍保藏的乳酸乳球菌接種到滅菌乳中，37℃培養12h后再按3％(V/V)比例轉接到滅菌乳中，37℃下培養至凝乳；

(2)增殖培養：將活化好的菌種按3～5％(V/V)的比例接入增殖培養基(番茄汁100mL、胡蘿卜汁100mL、牛乳800mL)，在37℃培養10h，得到培養液；

(3)菌體收集：將培養液在4℃、8000f/mim離心10～15min得到菌泥；

(4)預凍：將得到的菌泥與保護劑(甘氨酸∶脫脂乳∶蔗糖質量比為1∶2∶1)以1∶3比例混合，在-30℃預冷12小時；

(5)真空低溫冷凍干燥：將預凍后的菌泥加入凍干機，保持-40℃以下，冷凍干燥20～25小時，得到乳酸乳球菌干粉。

本發明步驟(2)中采用的增殖培養基成分為：番茄汁100mL、胡蘿卜汁100mL、牛乳800mL。

本發明的有益效果

(1)本發明方法采用的菌種分離自天然發酵的牦牛乳酸奶，具有自主知識產權。

(2)本發明的乳酸乳球菌干粉制備方法，具有方法簡單、易操作等優點。

(3)本發明生產的乳酸乳球菌干粉適用于在25℃下發酵酸奶或其它乳制品。

具體實施方式

下面的實施例可以進一步說明本發明，但不以任何方式限制本發明。

實施例1

將冷凍保藏的乳酸乳球菌接種到滅菌乳中，37℃培養12h后再按3％(V/V)比例轉接到滅菌乳中，37℃下培養至凝乳。將活化好的菌種按3％(V/V)的比例接入增殖培養基，在37℃培養10h，得到培養液。將培養液在4℃、8000r/mim離心10min得到菌泥。將得到的菌泥與保護劑以1∶3比例混合，在-30℃預冷12小時。將預凍后的菌泥加入凍干機，保持-40℃以下，冷凍干燥20小時，得到乳酸乳球菌干粉。

實施例2

將冷凍保藏的乳酸乳球菌接種到滅菌乳中，37℃培養12h后再按3％(V/V)比例轉接到滅菌乳中，37℃下培養至凝乳。將活化好的菌種按4％(V/V)的比例接入增殖培養基，在37℃培養10h，得到培養液。將培養液在4℃、6000r/mim離心12min得到菌泥。將得到的菌泥與保護劑以1∶3比例混合，在-30℃預冷12小時。將預凍后的菌泥加入凍干機，保持-40℃以下，冷凍干燥23小時，得到乳酸乳球菌干粉。

實施例3

將冷凍保藏的乳酸乳球菌接種到滅菌乳中，37℃培養12h后再按3％(V/V)比例轉接到滅菌乳中，37℃下培養至凝乳。將活化好的菌種按5％(V/V)的比例接入增殖培養基，在37℃培養10h，得到培養液。將培養液在4℃、8000r/mim離心15min得到菌泥。將得到的菌泥與保護劑以1∶3比例混合，在-30℃預冷12小時。將預凍后的菌泥加入凍干機，保持-40℃以下，冷凍干燥25小時，得到乳酸乳球菌干粉。