[發明專利]一種口蹄疫抗體水平檢測試紙及制備方法無效
| 申請號: | 201310317715.5 | 申請日: | 2013-07-25 |
| 公開(公告)號: | CN103344757A | 公開(公告)日: | 2013-10-09 |
| 發明(設計)人: | 孫波;唐道祝 | 申請(專利權)人: | 孫波 |
| 主分類號: | G01N33/569 | 分類號: | G01N33/569;G01N33/558;G01N33/531 |
| 代理公司: | 北京市中聞律師事務所 11388 | 代理人: | 王新發 |
| 地址: | 222200 江蘇省連云港市灌*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 口蹄疫 抗體 水平 檢測 試紙 制備 方法 | ||
1.一種口蹄疫抗體水平檢測試紙,其特征在于,包括震蕩器、檢測盒和設置于所述檢測盒內的口蹄疫抗體水平檢測試紙;所述口蹄疫抗體水平檢測試紙的檢測區包括設置在基板上的吸收墊,所述吸收墊由多孔纖維制成;在所述吸收墊的一端依次設有免疫金標層、硝酸纖維膜、吸收層;所述檢測盒底部側壁上設有試紙入口,所述試紙入口的形狀與所述口蹄疫抗體水平檢測試紙相適配以使所述口蹄疫抗體水平檢測試紙從所述試紙入口插入所述檢測盒內;所述口蹄疫抗體水平檢測試紙上設有檢測區;所述震蕩器頂部設有檢測液輸入口,底部設有檢測液出口,且所述檢測液出口設有可開合的活門;所述震蕩器的檢測液出口與檢測盒頂部的開口導通,所述檢測盒頂部的開口的位置與所述口蹄疫抗體水平檢測試紙的檢測區的位置相適配。
2.根據權利要求1所述的口蹄疫抗體水平檢測試紙,其特征在于,所述硝酸纖維膜上設有用抗O型口蹄疫病毒的兔或豚鼠IgG抗體形成的質控線,硝酸纖維膜上處于質控線的上游包被有O型口蹄疫病毒形成的檢測線,硝酸纖維膜的檢測線和免疫金標層吸附的膠體金標記的O型口蹄疫病毒是天然病毒,或者是基因重組表達口蹄疫病毒,或者是口蹄疫病毒的分解抗原。
3.一種如權利要求1或2所述的口蹄疫抗體水平檢測試紙的制備方法,包括:
步驟1、15~50納米的膠體金溶液
步驟2、先將膠體金溶液的pH值調至8.0~8.4,再在其中按每100ml膠體金溶液加入0.1~0.4mg口蹄疫病毒,攪拌均勻后,再在溶液中按0.2~1g/100ml加入動物血清蛋白,4℃靜置2~4小時,再將上述膠體金溶液離心去除沉淀物,得上清液,將上清液再經離心處理得沉淀物,所得沉淀物按4~10ml/100ml溶于含重量比0.2~0.6%的動物血清蛋白和0.01~0.06%疊氮鈉的0.02M?pH7.4?Tris-Hcl的緩沖液中得到膠體金標記的病毒溶液,將膠體金溶液浸入玻璃纖維至液體開始滲出為止,形成金標抗體層,將金標抗體層進行干燥處理;
步驟3、在硝酸纖維素膜中段噴檢測線,再取兔抗或鼠抗O型口蹄疫IgG調濃度為1.5~2.5mg/ml,,用噴膜機在纖維素膜中段,距檢測線0.5~1cm處,噴質控線,噴膜量按10~15ul/1cm設置,然后干燥處理,再用0.01m?PH7.0含小牛血清的磷酸緩沖液在37℃下封閉30分鐘,0.01ml?pH7.0的PBS漂洗后再次進行干燥處理得到硝酸纖維素膜;
步驟3、依次將金標抗體層、檢測段及吸收墊材料和吸收段固定在采用不透水材料制成的基板上。
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