[發(fā)明專利]一種口蹄疫抗體水平檢測試紙及制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310317715.5
• 申請日: 2013-07-25
• 公開（公告）號: CN103344757A
• 公開（公告）日: 2013-10-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫波;唐道祝
• 申請（專利權(quán)）人: 孫波
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558;G01N33/531
• 代理公司: 北京市中聞律師事務(wù)所 11388
• 代理人: 王新發(fā)

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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)療用品技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種口蹄疫抗體水平檢測試紙及制備方法。

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背景技術(shù)

口蹄疫(Foot-and-Mouth，F(xiàn)MD)是由口蹄疫病毒引起的一種急性、熱性、高度接觸傳染性的動物疫病，其主要侵染對象是豬、牛、羊等偶蹄動物，一旦發(fā)生很難控制，會對社會經(jīng)濟(jì)造成重大影響。

鑒于口蹄疫可造成的巨大經(jīng)濟(jì)損失和社會影響，各國政府都非常重視口蹄疫的防治研究。現(xiàn)采用的抗體檢測方法主要有CFT、VNT、凝集試驗(yàn)、免疫擴(kuò)散和ELISA等，但是這些方法都需要在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行檢測，檢測周期長，無法對口蹄疾進(jìn)行快速準(zhǔn)確的檢測。

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發(fā)明內(nèi)容

針對當(dāng)前的口蹄疫檢測需要在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)完成的問題，本發(fā)明實(shí)施例提出一種能夠現(xiàn)場對口蹄疫抗體水平進(jìn)行檢測以提高檢測實(shí)時性的口蹄疫抗體水平檢測試紙及制備方法。

為了實(shí)現(xiàn)該目的，本發(fā)明提供了一種口蹄疫抗體水平檢測試紙，包括震蕩器、檢測盒和設(shè)置于所述檢測盒內(nèi)的口蹄疫抗體水平檢測試紙；所述口蹄疫抗體水平檢測試紙的檢測區(qū)包括設(shè)置在基板上的吸收墊，所述吸收墊由多孔纖維制成；在所述吸收墊的一端依次設(shè)有免疫金標(biāo)層、硝酸纖維膜、吸收層；所述檢測盒底部側(cè)壁上設(shè)有試紙入口，所述試紙入口的形狀與所述口蹄疫抗體水平檢測試紙相適配以使所述口蹄疫抗體水平檢測試紙從所述試紙入口插入所述檢測盒內(nèi)；所述口蹄疫抗體水平檢測試紙上設(shè)有檢測區(qū)；所述震蕩器頂部設(shè)有檢測液輸入口，底部設(shè)有檢測液出口，且所述檢測液出口設(shè)有可開合的活門；所述震蕩器的檢測液出口與檢測盒頂部的開口導(dǎo)通，所述檢測盒頂部的開口的位置與所述口蹄疫抗體水平檢測試紙的檢測區(qū)的位置相適配。

其中，所述硝酸纖維膜上設(shè)有用抗O型口蹄疫病毒的兔或豚鼠IgG抗體形成的質(zhì)控線，硝酸纖維膜上處于質(zhì)控線的上游包被有O型口蹄疫病毒形成的檢測線，硝酸纖維膜的檢測線和免疫金標(biāo)層吸附的膠體金標(biāo)記的O型口蹄疫病毒是天然病毒，或者是基因重組表達(dá)口蹄疫病毒，或者是口蹄疫病毒的分解抗原。

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同時，本發(fā)明實(shí)施例還提出了前述任意一種口蹄疫抗體水平檢測試紙的制備方法，包括：

步驟1、15～50納米的膠體金溶液

步驟2、先將膠體金溶液的pH值調(diào)至8.0～8.4，再在其中按每100ml膠體金溶液加入0.1～0.4mg口蹄疫病毒，攪拌均勻后，再在溶液中按0.2～1g/100ml加入動物血清蛋白，4℃靜置2～4小時，再將上述膠體金溶液離心去除沉淀物，得上清液，將上清液再經(jīng)離心處理得沉淀物，所得沉淀物按4～10ml/100ml溶于含重量比0.2～0.6％的動物血清蛋白和0.01～0.06％疊氮鈉的0.02M?pH7.4?Tris-Hcl的緩沖液中得到膠體金標(biāo)記的病毒溶液，將膠體金溶液浸入玻璃纖維至液體開始滲出為止，形成金標(biāo)抗體層，將金標(biāo)抗體層進(jìn)行干燥處理；

步驟3、在硝酸纖維素膜中段噴檢測線，再取兔抗或鼠抗O型口蹄疫IgG調(diào)濃度為1.5～2.5mg/ml，，用噴膜機(jī)在纖維素膜中段，距檢測線0.5～1cm處，噴質(zhì)控線，噴膜量按10～15ul/1cm設(shè)置，然后干燥處理，再用0.01m?PH7.0含小牛血清的磷酸緩沖液在37℃下封閉30分鐘，0.01ml?pH7.0的PBS漂洗后再次進(jìn)行干燥處理得到硝酸纖維素膜；

步驟3、依次將金標(biāo)抗體層、檢測段及吸收墊材料和吸收段固定在采用不透水材料制成的基板上。

本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明提出了一種多口蹄疫抗體水平檢測試紙及制備方法，能夠快速的對口蹄疫抗體水平進(jìn)行檢測。在使用時可以將待檢測樣本放入震蕩器中，加入稀釋液后關(guān)閉震蕩器后搖晃該震蕩器以充分混合，然后打開震蕩器底部的閥將混合后的液體通過該檢測盒準(zhǔn)確的滴注到試紙的檢測區(qū)上。這種結(jié)構(gòu)能夠方便的在野外使用，提高檢測的效率。

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附圖說明

通過下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行的描述，本發(fā)明的技術(shù)方案及其技術(shù)效果將變得更加清楚，且更加易于理解。其中：

圖1為本發(fā)明實(shí)施例的口蹄疫抗體水平檢測試紙的剖視結(jié)構(gòu)示意圖。

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具體實(shí)施方式