[發明專利]黃曲霉毒素M1金標快速檢測卡及其制備方法和應用

無效

• 申請號: 201310317618.6
• 申請日: 2013-07-25
• 公開（公告）號: CN103412124A
• 公開（公告）日: 2013-11-27
• 發明（設計）人: 何艷玲;王麗麗;唐慧林;趙瑜;于重楠;王麗哲;劉敏;李瑾
• 申請（專利權）人: 北京陸橋技術有限責任公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/558
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于免疫學領域，涉及原料奶中黃曲霉毒素M1快速檢測產品和方法。

背景技術

黃曲霉毒素(Aflatoxin，AF）屬于黃曲霉毒素類的一種，均為二氫呋喃香豆素的衍生物，是食品中廣泛存在的一種高致癌性真菌毒素，是黃曲霉(Asperillusflavus)和寄生曲霉(Asperillus?parasiticus)的二次代謝產物。黃曲霉毒素M1(Aflatoxin?M1，AFM₁)是動物攝入黃曲霉毒素B1(Aflatoxin?B1，AFB₁)后在體內經羥基化而形成的產物，其危害主要表現在致癌性和致突變性，對人及動物肝臟組織有破壞作用，可導致肝癌甚至死亡，主要存在于動物的可食部分，如乳、肝、蛋類等，其中以乳最為常見。

在動物實驗中，成功誘發肝癌的動物有大鼠、小鼠、豚鼠、雪豹、鴨狗、貓、兔、猴等，所以AFM₁被國際食品準則委員會列為ⅡB人類致癌物，現在已歸為一類致癌物。我國于1998年規定牛乳中AFM₁的限量標準為0.5μg/Kg，與美國、日本的限量標準類似，但是遠比歐盟的限量標準寬松。2004年國家質檢總局發布消息稱，歐盟公布了新的黃曲霉毒素限量標準，其中規定在包括谷類食品在內的嬰幼兒食品以及具有特殊醫療目的的嬰兒食品中，AFM₁的最大限量分別為0.1和0.025μg/kg，該規定在2005年11月1日起在所有的成員國實施。鑒于國外對AFM₁限量標準的進一步提高的趨勢，我國急需制定新的相關標準，同時需要開發與新標準相適應的新的AFM₁快速檢測方法。

國內外檢測AF的方法有微柱法、薄層色譜法（TLC）、液相色譜法（LC）、ELISA等。

Romer微柱法于1975年首次通過，1988年最后通過作為AOAC的法定方法。該法適用于檢測食品及飼料中的總AF。Holaday-Velasco微柱法于1979年首次通過，1988年最后通過AOAC法定方法。該法適用于檢測白玉米﹑黃玉米﹑生的去殼花生中≥10μg/kg的總AF。TLC是檢測AF常用的方法。AOAC的TLC法有檢測花生和花生制品中AF的CB法和BF法，這兩種方法均作為法定方法于1988年首次通過。還有檢測椰子、干椰子和椰子粉、玉米、鮮咖啡、開心果、大豆、雞蛋、奶及奶制品、肝等食品中測定AF/AFB₁/AFM₁的TLC法也作為法定方法于1988年最后通過。20世紀90年代AOAC開始將免疫學用于檢測AF的法定方法。

我國于20世紀70年代初建立檢測各種食品中AF的方法。測定AFB₁的TLC法已通過作為國標方法(GB/T5009.22-1996)，該方法適用于糧食、花生及其制品、薯類、豆類、發酵食品及酒類等各種食品中AFB₁的測定；AFB₁與AFM₁的TLC法。GB/T5009.24-1996)適用于測定牛乳及其制品﹑黃油及新鮮豬組織(肝、腎、血及瘦肉)等食品中的AFB1和AFM₁、AFB₂、AFG₁、AFG₂的TLC法，適用于各種食品中的總AF的測定。AFB₁、AFB₂、AFG₁、AFG₂的微柱篩選法。(GB/T500009.23-1996)可用于測定各種食品中總AF。除上述方法外，還建立了測定各種食品中AF的ELISA以及HPLC法等，這些檢測方法的建立為食品中AF的污染監測提供了技術支撐。

但這些檢測方法對操作人員的專業技術要求高、前處理方法復雜、檢測時間長、需昂貴儀器的輔助以及單個樣品檢測成本高等特點不能廣泛的應用于大量樣品的快速篩查。膠體金免疫層析技術很好的規避了上述問題，具有檢測速度快、檢測成本低、對操作人員專業要求不高等特點，可應用于實驗室和現場的殘留檢測。

發明內容

本發明解決的技術問題是提供一種能夠對原奶樣品中黃曲霉毒素M1殘留進行快速篩選檢測的試劑盒及其檢測方法和應用；發明主要目的在于實現大量樣品的快速篩選檢測，解決傳統檢測方法耗時長、成本高、操作人員專業要求高、需儀器設備輔助，不能實現大量樣品的快速篩查等特點，同時通過樣品前處理實現不同檢測靈敏度的檢測，滿足不同客戶的檢測需求，從而提供一種更加快速、簡捷、性價比高、安全的檢測試劑盒及檢測方法。