[發明專利]一種抗鴨病毒性肝炎組合物、凍干粉、制備方法及應用

有效

• 申請號: 201310315435.0
• 申請日: 2013-07-24
• 公開（公告）號: CN104162161A
• 公開（公告）日: 2014-11-26
• 發明（設計）人: 吳紅云;趙小中;郭俊清
• 申請（專利權）人: 河南聯合英偉飼料有限公司
• 主分類號: A61K39/42
• 分類號: A61K39/42;A61K9/19;A23K1/16;A61P1/16;A61P31/12;A61K38/00
• 代理公司: 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119
• 代理人: 牛愛周

1.一種抗鴨病毒性肝炎組合物，其特征在于：由以下重量份的組分組成：抗鴨病毒性肝炎卵黃抗體92～97份，抗鴨病毒性肝炎轉移因子1～3份。

2.一種抗鴨病毒性肝炎凍干粉，其特征在于：由以下重量份的組分組成：抗鴨病毒性肝炎卵黃抗體95～97份，抗鴨病毒性肝炎轉移因子1～2份，滅活劑0.2～0.3份，防腐劑0.01～0.02份，耐熱凍干保護劑2.05～3.6份。

3.根據權利要求2所述的抗鴨病毒性肝炎凍干粉，其特征在于：所述的滅活劑為甲醛。

4.根據權利要求2所述的抗鴨病毒性肝炎凍干粉，其特征在于：所述的防腐劑為硫柳汞。

5.根據權利要求2所述的抗鴨病毒性肝炎凍干粉，其特征在于：所述的耐熱凍干保護劑由以下重量份的組分組成：硒0.05～0.1份，維生素C0.5～1份，聚乙烯吡咯烷酮1～2份，甘氨酸0.5份。

6.一種如權利要求2-5任一項所述的抗鴨病毒性肝炎凍干粉的制備方法，其特征在于：具體步驟如下：

（1）分離毒株制備疫苗：取鴨病毒性肝炎病毒株增殖、滅活后制得疫苗備用；

（2）免疫健康雞群制備高免蛋：取步驟（1）制備的疫苗免疫接種健康雞群，當抗體效價達到1:256時，收集高免蛋清理、消毒后晾干備用；

（3）酸化處理：取步驟（2）制備的高免蛋分離卵黃，加入等體積的無菌水，充分攪拌至顏色發白得卵黃溶液，在卵黃溶液中加入pH值為4.9～5.2的酸化水，加入量為卵黃溶液體積的8倍，混勻后靜置沉淀；

（4）取步驟（3）靜置后的上清液，按體積加入0.8%的NaCl和NaSO₄混合物，離心得含有抗鴨病毒性肝炎卵黃抗體的上清液；

（5）取步驟（4）中的上清液，上清液中抗鴨病毒性肝炎卵黃抗體的量為95～97份，再在上清液中加入1～2份的抗鴨病毒性肝炎轉移因子，混勻后依次用0.45μm和0.22μm的濾膜過濾；

（6）將步驟（5）的濾液濃縮得濃縮液，在濃縮液中依次加入0.2～0.3份的滅活劑、0.01～0.02份的防腐劑及2.05～3.6份的耐熱凍干保護劑，混勻后經預凍、凍干處理即得抗鴨病毒性肝炎凍干粉。

7.根據權利要求6所述的抗鴨病毒性肝炎凍干粉的制備方法，其特征在于：所述步驟（2）中第一次使用滅活疫苗正常量，為10^3.2ELD₅₀/0.1ml鴨病毒性肝炎病毒滅活疫苗1.5mL，間隔7天免疫1次，后續每次免疫增加1倍量，于第二次免疫后開始檢測抗體效價。

8.根據權利要求6所述的抗鴨病毒性肝炎凍干粉的制備方法，其特征在于：所述步驟（4）中NaCl與NaSO₄的質量比為4:1。

9.根據權利要求6所述的抗鴨病毒性肝炎凍干粉的制備方法，其特征在于：所述步驟（5）中抗鴨病毒性肝炎轉移因子的制備方法為：

（1）用滅菌后的生理鹽水清洗用鴨病毒性肝炎抗原免疫過的豬脾臟，去其表面筋、脂肪等組織，再用生理鹽水沖洗；

（2）將步驟（1）處理后的豬脾臟破碎，加入2倍預冷的PBS緩沖液，用組織勻漿儀將其勻質得勻漿液；

（3）將步驟（2）中的勻漿液用超聲破碎儀處理10min得破碎液；

（4）將步驟（3）的破碎液調至pH值為5.3～5.7，6000rpm離心30min，收集上清液；

（5）將步驟（4）的上清液用微濾膜過濾，截留分子量7000道爾頓的物質，收集上清液；

（6）將步驟（5）的上清液用除菌濾膜過濾，得到抗鴨病毒性肝炎轉移因子原液，4℃保存或凍干備用。

10.一種如權利要求2-5任一項所述的抗鴨病毒性肝炎凍干粉在制備飼料中的應用，其特征在于：步驟如下：取抗鴨病毒性肝炎凍干粉，按照重量百分比為0.2～0.6%加入飼料中，混勻即得。