[發(fā)明專(zhuān)利]一種利用酶化法從葡萄皮渣中提取白藜蘆醇的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310314468.3
• 申請(qǐng)日: 2013-07-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103333054A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-10-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 林建民
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 林建民
• 主分類(lèi)號(hào): C07C39/21
• 分類(lèi)號(hào): C07C39/21;C07C37/68
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物有效成分的分離提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種利用酶化法從葡萄皮渣中提取白藜蘆醇的方法。

背景技術(shù)

白藜蘆醇(resveratrol?：trans-3，5，4’-trihydroxystilbene)?是一種芪類(lèi)化合物(stilbenes)，簡(jiǎn)寫(xiě)為Res，存在于一些藥用植物和食用植物中，如決明、藜蘆、虎杖、葡萄、花生。

白藜蘆醇（Res）既是腫瘤疾病的化學(xué)預(yù)防劑，也是對(duì)降低血小板聚集，預(yù)防、治療動(dòng)脈粥樣硬化，心腦血管疾病的化學(xué)預(yù)防劑，抑制血小板非正常凝聚，預(yù)防心肌硬塞、腦栓塞，對(duì)缺氧心臟有保護(hù)作用，對(duì)燒傷或失血性休克引起的心輸出量下降有效恢復(fù)，并能夠擴(kuò)張動(dòng)脈血管及改善微循環(huán)。除此之外，白藜蘆醇（Res）也是一種抗自由基、抗氧化劑，與之相關(guān)的功能如下：1、延緩衰老；2、阻止低密度脂蛋白的氧化，具有潛在的防治心血管疾病(?動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病、缺血性心臟病、高血脂癥等)?的作用；3、影響脂類(lèi)及花生四烯酸代謝；4、抗血栓、抗血小板聚集5、抗炎、抗過(guò)敏作用。

近年來(lái)，白藜蘆醇（Res）提取物的原料來(lái)源是虎杖等植物，這些植物隨著白藜蘆醇（Res）市場(chǎng)緊俏，虎杖原料的消耗量越來(lái)越大，其植物資源日漸匱乏，原料價(jià)格逐步攀升，最終使得白藜蘆醇（Res）的生產(chǎn)成本也大大提高。為此，從葡萄有關(guān)成分中制備白藜蘆醇（Res）提取物成為了材料穩(wěn)定、性?xún)r(jià)比高的有效途徑。

目前由于葡萄酒產(chǎn)量的增長(zhǎng)，葡萄酒的生產(chǎn)隨之產(chǎn)生大量葡萄皮渣，葡萄皮渣中就含有很高抗癌、防癌活性的以白藜蘆醇（Res）為代表的芪類(lèi)物質(zhì)。因此，如果能以葡萄皮渣等為原材料提取白藜蘆醇（Res）等活性物質(zhì)，不僅原料來(lái)源豐富，而且成本低廉。

現(xiàn)階段從葡萄皮渣中提取白藜蘆醇（Res）的方法主要有有機(jī)溶劑提取法、酶法提取、微波萃取、超臨界CO：萃取和超聲波提取法等，上述方法中主要存在的問(wèn)題如下：1、溶劑提取法主要存在有機(jī)溶劑消耗多，提取工藝耗時(shí)長(zhǎng)，生產(chǎn)成本高，得到的產(chǎn)品中殘留有溶劑，同時(shí)在提取的過(guò)程中溶劑外泄，造成提取環(huán)境差、對(duì)環(huán)境污染等問(wèn)題，如果控制溶劑外泄，勢(shì)必造成生產(chǎn)設(shè)備復(fù)雜、投資和操作費(fèi)用高，成本增加等一系列問(wèn)題；2、超臨界CO2?提取法主要是生產(chǎn)成本太高、對(duì)操作條件的要求比較高；3、微波提取法存在的不足之處在于，萃取介質(zhì)的選擇對(duì)產(chǎn)物組分影響較大，導(dǎo)致部分有效成分的損失。4、超聲波提取法提取的白藜蘆醇（Res）活性物質(zhì)含量雖然比有機(jī)溶劑提取法提取的多，但整體來(lái)說(shuō)仍然偏少。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種方法簡(jiǎn)單、提取率高、生產(chǎn)成本低的利用酶化法從葡萄皮渣中提取白藜蘆醇的方法。

為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:

一種利用酶化法從葡萄皮渣中提取白藜蘆醇的方法，其包括以下工藝步驟：

（1）葡萄皮渣干燥：將回收酒液后的葡萄皮渣，經(jīng)過(guò)自然風(fēng)干除去剩余水分至含水率小于4％；

（2）粉碎：將風(fēng)干后的葡萄皮渣粉碎至60-80目；

（3）稱(chēng)取粉碎至60-80目的葡萄皮渣50g，加1000ml重蒸水和50mg纖維素酶，在酶解溫度27-61℃下恒溫酶解1-6h，酶解后加1000ml的固液比為1：20的乙酸乙酯于20-90℃的水浴中浸提0.5-24h，濾渣中加入乙酸乙酯重復(fù)浸提1-5次，浸提的濃縮液采用高效液相色譜儀測(cè)試得到白藜蘆醇含量為160．3799ppm；

（4）將重復(fù)浸提的濃縮液進(jìn)行混合后，置于40-60℃的真空干燥箱中，干燥后得白藜蘆醇粗粉；

（5）白藜蘆醇純化：稱(chēng)取預(yù)處理好的NKA-9?型大孔樹(shù)脂1g于50ml?的具塞錐形瓶中，稱(chēng)取干燥所得的白藜蘆醇粗粉0.5g?溶于10ml?體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇溶液中，加入到具塞錐形瓶中置于搖床上振蕩，振蕩溫度為30℃、吸附時(shí)間15min?；吸附完畢后，將飽和的吸附樹(shù)脂先用水進(jìn)行洗脫，直到洗脫液為無(wú)色透明為止，再用100ml?體積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇溶液再次進(jìn)行洗脫，洗脫時(shí)間為15min、洗脫溫度40℃；將洗脫液收集、回收溶劑、濃縮得到含有白藜蘆醇的少量液體；進(jìn)一步通過(guò)硅膠柱層析進(jìn)行分離提純，洗脫液的體積配比為1?∶?1?的石油醚∶丙酮混合溶液進(jìn)行梯度洗脫，對(duì)洗脫液分段收集、濃縮，并回收溶劑，真空干燥得到白藜蘆醇粉末，純度達(dá)到95％以上。

上述的利用酶化法從葡萄皮渣中提取白藜蘆醇的方法，其所述的步驟（1）中，將回收酒液后的葡萄皮渣，經(jīng)過(guò)自然風(fēng)干除去剩余水分至含水率為3％。