[發明專利]聯苯三唑醇分子印跡固相萃取柱的制備方法和應用

有效

• 申請號: 201310312954.1
• 申請日: 2013-07-24
• 公開（公告）號: CN103342774A
• 公開（公告）日: 2013-10-09
• 發明（設計）人: 高文惠;劉博
• 申請（專利權）人: 河北科技大學
• 主分類號: C08F220/06
• 分類號: C08F220/06;C08F222/14;C08J9/28;B01D15/08;G01N30/08;G01N30/14
• 代理公司: 石家莊科誠專利事務所 13113
• 代理人: 馬淑文

技術領域

本發明涉及有機合成和分析化學領域，具體的說是聯苯三唑醇分子印跡固相萃取柱的制備方法和應用，用于食品和飼料中聯苯三唑醇及其結構類似物殘留分析時樣品的凈化和富集。

背景技術

聯苯三唑醇是廣譜內吸殺菌劑，主要用來防治由黑星菌屬(Venturia)和核盤菌屬(Sclerotinia)引起的果樹病害，以及球腔菌屬(Mycosphaerella)引起的香蕉病害和花生葉斑病；其具有高效、廣譜、低毒、強內吸性等特點，其防治機理主要是對病原菌麥角甾醇的生物合成起抑制作用，使菌體細胞膜功能受到破壞。

按中國農藥毒性分級標準，聯苯三唑醇及其結構類似物屬于低毒殺菌劑，大鼠急性經口LD₅₀＞4000mg/kg，雄小鼠急性經口LD₅₀約為2000mg/kg。超標使用必然會導致食品及飼料的安全出現隱患，相關檢測部門應給予高度的重視。

化學殺菌劑對于人體和動物體內分泌有不良的干擾作用。這些物質主要導致：

⑴損害神經系統；

⑵機體的生殖機能下降或異常現象；

⑶降低生物體的免疫能力并誘發腫瘤。

食品及飼料樣品組成比較復雜，被分析物處于痕量狀態，易受到干擾，樣品前處理成為食品安全分析的關鍵步驟。傳統的樣品前處理技術主要有液液萃取、索氏提取等，它們存在處理時間長、操作繁瑣、回收率不穩定、重復性差、選擇性差、有機溶劑用量大，污染環境、易乳化、不易實現自動化等缺點。而分子印跡固相萃取技術恰好克服了以上傳統技術的缺點，而且還具有對目標物特異性選擇的特點。

傳統固相萃取的缺點是：⑴被分析物的實際回收率低；⑵固相萃取物與吸附劑之間的作用力是非特異性的，萃取和洗脫條件比較苛刻；⑶選擇性差，處理雜質不完全，易造成色譜柱污染；⑷不可反復使用。

分子印跡聚合物（Molecularly?Imprinted?Polymers，MIPs）是指為獲得在空間構型和結合位點上與某一目標化合物（模板分子或印跡分子）完全匹配的高分子聚合物，分子印跡技術被形象的比喻為制造識別“分子鑰匙”的“人工鎖”技術。

MIPs作為SPE的吸附劑可以彌補普通吸附劑選擇性差的不足，而且要比免疫吸附劑的穩定性好，還可以重復使用，使痕量被分析物在復雜樣品中得到分離富集。分子印跡固相萃取技術能夠克服食品及飼料樣品體系復雜、預處理繁瑣等不利因素，達到分離純化的目的，從而降低檢測限，提高分析的精密度和準確性，為痕量組分的富集和分析提供極大的方便。

分子印跡固相萃取技術具有以下優點:(1)對目標物能進行特異性吸附；(2)能耐高溫、高壓、有機溶劑；(3)重復使用次數多；⑷穩定性好、使用壽命長等優點。它克服了醫藥、生物及環境樣品體系復雜、預處理繁瑣等缺點，因此它已成為分子印跡技術在食品及飼料分析中最具應用前景的研究熱點。

發明內容

本發明的目的是想提供一種聯苯三唑醇分子印跡固相萃取柱的制備方法和應用。

本發明采用本體聚合方法制備聯苯三唑醇分子印跡聚合物，所制備的聚合物經研磨、漂洗、過篩、洗脫、干燥等一系列處理后，再經紫外分光光度法和高效液相色譜法對其進行評價分析即可得到具有特異性吸附效果的聚合物材料，并制備分子印跡固相萃取柱，用于樣品凈化，對食品及飼料中聯苯三唑醇及其結構類似物進行分離和富集。

本發明所采用的技術方案具體制備步驟如下：

a.?通過紫外分光光度法測定模板分子聯苯三唑醇與功能單體α-甲基丙烯酸摩爾配比為1:4。

b.?先將模板分子溶于致孔劑中，加入功能單體，加入致孔劑乙腈，添加量為15mL；得到混合溶液；?

c.?將步驟b的混合溶液振動頻率50kHz超聲1h混勻；

d.?在步驟?c得到的溶液中加入交聯劑和引發劑，然后振動頻率50kHz超聲30min，之后通入高純氮氣15min，抽真空1min；所述交聯劑加入量為模板物質的摩爾量的4倍，所述引發劑加入量為模板物質摩爾量的0.06倍；

e.?將步驟d得到的反應體系置于55℃水浴中振搖24h，使其形成乳白色塊狀聚合物，即為印跡聚合物；

f.?將步驟e中的印跡聚合物研磨后，過200目篩，再用水洗滌至沉降后上層水清澈，烘干后用體積比為95:5的甲醇-乙酸混合溶液索氏提取至無模板物質為止；然后用甲醇浸泡1h，所得聚合物于45℃烘干6h，即得到具有特異性識別的分子印跡聚合物；