[發(fā)明專利]一種用于染色體數(shù)目異常快速檢測的半特異性擴增引物組、方法及試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310312815.9
• 申請日: 2013-07-24
• 公開（公告）號: CN103397089A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳重建;梁峻彬;劉洋洋
• 申請（專利權(quán)）人: 安諾優(yōu)達基因科技(北京)有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種用于染色體數(shù)目異常快速檢測的半特異性擴增引物組，其特征在于：

（1）第一輪擴增中選取正向引物1a?或正向引物1b為正向引物，選取反向引物1為反向引物；

正向引物1a：

5’-GGCTATAAACGCAGGCCACTCNNNNNNNNNNNNNNNNNGGGAGGGGAACATCACAC-3’

正向引物1b：?

5’-GGCTATAAACGCAGGCCACTCBDVHBDVHBDVHBDVHBDVHGGGAGGGGAACATCACAC-3’

反向引物1：

5’-TCTGAGGAATCAGCAATGCAGCGATCATGGTGGTTTGCTGCA-3’

???????其中N、B、D、V、H為簡并堿基

（2）第二輪擴增中選取正向引物2與反向引物2

正向引物2：

5’-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACGGCTATAAACGCAGGCCACTC-3’

反向引物2：

5’-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATNNNNNNNNTCTGAGGAATCAGCAATGCAGCGAT-3’

其中NNNNNNNN為特定堿基，為樣本的標簽序序列，不同樣本標簽序列不同。

2.如權(quán)利要求1所述的引物組，其特征在于，其中第一輪引物組用于初步富集擴增模版DNA并加入連接序列。

3.如權(quán)利要求1所述的引物組，其特征在于，第一輪擴增正向引物中連接序列為GGCTATAAACGCAGGCCACTC。

4.如權(quán)利要求2所述的引物組,其特征在于,第一輪擴增中正向引物1a中NNNNNNNNNNNNNNNNNGGGAGGGGAACATCACAC為目的片段擴增區(qū)域。

5.如權(quán)利要求4所述的引物組，其特征在于,第一輪擴增中正向引物1a中特異性序列為GGGAGGGGAACATCACAC，非特異性擴增序列為NNNNNNNNNNNNNNNNN。

6.如權(quán)利要求2所述的引物組，其特征在于，第一輪擴增中正向引物1b中BDVHBDVHBDVHBDVHBDVHGGGAGGGGAACATCACAC為目的片段擴增區(qū)域。

7.如權(quán)利要求6所述的引物組，其特征在于，第一輪擴增中正向引物1b中GGGAGGGGAACATCACAC為特異性序列，非特異性擴增序列為BDVHBDVHBDVHBDVHBDVH。

8.如權(quán)利要求1所述的引物組，其特征在于，第一輪擴增中反向引物中連接序列為TCTGAGGAATCAGCAATGCAGCGAT。

9.如權(quán)利要求1所述的引物組，其特征在于，第一輪擴增中反向引物中目的片段特異性擴增區(qū)域為CATGGTGGTTTGCTGCA。

10.如權(quán)利要求1所述的引物組,其特征在于,第二輪擴增引物為文庫建構(gòu)引物。

11.如權(quán)利要求1所述的引物組,其特征在于,正向引物2中AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACAC為嫁接引物接頭。

12.如權(quán)利要求1所述的引物組,其特征在于,正向引物2中GGCTATAAACGCAGGCCACTC為連接序列。

13.如權(quán)利要求1所述的引物組,其特征在于,反向引物2中CAAGCAGAAGACGGCATACGAGAT為嫁接引物接頭。

14.如權(quán)利要求1所述的引物組，其特征在于，反向引物2中NNNNNNNN為樣本標簽序列。

15.如權(quán)利要求1所述的引物組,其特征在于,反向引物2中TCTGAGGAATCAGCAATGCAGCGAT為連接序列。

16.如權(quán)利要求1所述的引物組，其特征在于，兩輪擴增中的B、D、V、H及N為簡并堿基。