[發(fā)明專利]一種用于產(chǎn)前診斷的DNA文庫構(gòu)建方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310311764.8
• 申請日: 2013-07-23
• 公開（公告）號: CN103361743A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳重建;梁峻彬;玄兆伶;王占東
• 申請（專利權(quán)）人: 安諾優(yōu)達基因科技(北京)有限公司
• 主分類號: C40B50/06
• 分類號: C40B50/06;C40B40/08;C12Q1/68
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1.一種DNA文庫的建庫方法,其特征在于方法步驟如下：

（1）.對孕婦血漿中游離DNA進行末端修復，純化；

（2）.對1步驟所得DNA進行3’端加“A”堿基處理；

（3）.對2步驟所得DNA兩端進行加接頭處理，純化；

（4）.對3步驟所得DNA進行PCR，純化后DNA文庫構(gòu)建完成。

2.如權(quán)利要求1所述的DNA文庫構(gòu)建方法，其特征在于，步驟（1）省略了從孕婦血漿中提取DNA的步驟，通過T4?DNA聚合酶、大腸桿菌DNA多聚酶I大片段(Klenow片段)、和多核苷酸激酶T4（T4?PNK），使突出端磷酸化成平末端。

3.如權(quán)利要求1所述的DNA文庫構(gòu)建方法，其特征在于，步驟（2）省略了DNA的3’端加“A”堿基處理后的純化步驟。

4.如權(quán)利要求1所述的DNA文庫構(gòu)建方法，其特征在于，步驟（3）中連接反應所需接頭為：

接頭序列1：5’?P-GATCGGAAGAGCACACGTCT?3’

接頭序列2：5’?P-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT?3’。

5.如權(quán)利要求1所述的DNA文庫構(gòu)建方法，其特征在于，步驟（4）中PCR反應使用的DNA聚合酶為Platinum??Pfx?DNA?Polymerase。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5所述的方法制得的DNA文庫。

7.一種DNA?測序方法，其特征在于，包括將權(quán)利要求1-5?所述的DNA?文庫進行測序的步驟；具體地，使用高通量測序平臺進行測序，所述高通量測序平臺為illumina測序平臺。