[發(fā)明專利]一種黃芪糖蛋白及其制備方法和用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310311439.1
• 申請(qǐng)日: 2009-07-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103450354A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-12-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周然;馮前進(jìn);薛慧清;楊向竹;牛欣;趙俊云;宋強(qiáng);王永輝;張立偉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山西中醫(yī)學(xué)院
• 主分類號(hào): C07K14/415
• 分類號(hào): C07K14/415;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;A61K38/16;A61P37/06
• 代理公司: 北京三聚陽(yáng)光知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11250
• 代理人: 張韜

1.一種黃芪糖蛋白（HQGP），其特征在于該糖蛋白的分子量為50-55kD。

2.如權(quán)利要求1所述的黃芪糖蛋白，其特征在于該糖蛋白的分子量為53.26kD。

3.如權(quán)利要求1或2所述的黃芪糖蛋白，其特征在于該糖蛋白呈乳白色粉狀，易溶于水，不溶于有機(jī)溶劑甲醇、乙醇、乙醚、丙酮和氯仿；濃度為0.096mg/ml的黃芪糖蛋白水溶液于23℃下測(cè)定pH值為5.8；濃度為0.08g/100ml的黃芪糖蛋白水溶液的比旋光度為-56.38°。

4.如權(quán)利要求1或2所述的黃芪糖蛋白，其特征在于將該黃芪糖蛋白配置成濃度為0.5mg/ml的水溶液，以水為空白，在200nm-320nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描得紫外光譜圖，顯示特征吸收峰為485nm和280nm。

5.如權(quán)利要求1或2所述的黃芪糖蛋白，其特征在于該黃芪糖蛋白配置成濃度為0.5mg/ml的水溶液，采用KBr壓片法，在4000cm^-1-500cm^-1范圍內(nèi)掃描，得紅外圖譜，吸收峰位于3500cm^-1-2800cm^-1之間，3399.2,2962.6,1643.2,1546.2,1403.0,1246.5cm-1處有明顯吸收峰；其中3399.2cm^-1為多糖羥基伸縮振動(dòng)吸收峰，2962.6cm^-1糖C-H伸縮振動(dòng)吸收峰，1403cm^-1為多糖C-O振動(dòng)吸收峰，1246.5cm^-1為吡喃糖環(huán)醚鍵C-O-C的吸收峰，1643.2cm^-1和1546.2cm^-1處為酰胺基的N-H振動(dòng)吸收峰。

6.如權(quán)利要求1或2所述的黃芪糖蛋白，其特征在于該糖蛋白的糖肽的結(jié)合方式為N-糖肽鍵。

7.如權(quán)利要求1或2所述的黃芪糖蛋白，其特征在于該糖蛋白中氨基酸組成及含量為：每100g糖蛋白含氨基酸總量57.18g，其中天門冬氨酸4.50g，蘇氨酸3.20g，絲氨酸2.33g，谷氨酸6.49g，甘氨酸3.83g，丙氨酸1.68g，胱氨酸1.42g，纈氨酸5.99g，蛋氨酸0.92g，異亮氨酸2.31g，亮氨酸2.34g，酪氨酸4.39g，苯丙氨酸1.93g，賴氨酸6.50g，組氨酸2.00g，精氨酸1.44g，脯氨酸5.91g。

8.如權(quán)利要求1至7任一所述的黃芪糖蛋白，其特征在于該糖蛋白由如下方法制備而成：

取黃芪藥材，將其粉碎成粉末狀，稱取200-600重量份，加水1200-2000體積份,浸泡8-16小時(shí)，40-60℃以下浸提1-3小時(shí)，過(guò)濾；殘?jiān)性偌铀?00-1600體積份，40-60℃以下浸提1-3小時(shí)，過(guò)濾，合并兩次濾液，以2000-4000r/min速度離心20-40分鐘，合并上清液，得粗提液；

將粗提液濃縮至200-400體積份，加入研磨成粉狀的硫酸銨，邊加邊攪拌至飽和，于2-6℃下靜置12—24小時(shí)，以2000-4000r/min速度離心20-40分鐘，棄去上清液，得沉淀；

沉淀加入少量水溶解，再加入硫酸銨至飽和，靜置1-3小時(shí)，以2000-4000r/min速度離心20-40分鐘，棄去上清液，沉淀再用少量水溶解，重復(fù)上述步驟，得到沉淀，為粗糖蛋白；

把粗糖蛋白加少量水溶解，加入sevag試劑，劇烈振搖10-30分鐘，離心，傾出上清液，除去中間層黃色膠狀變性蛋白和下層氯仿，重復(fù)該步驟至中間層幾乎無(wú)變性蛋白；

將上清液置于透析袋中，純水透析24-72小時(shí)，得黃芪糖蛋白溶液，經(jīng)冷凍干燥，得乳白色粉狀物黃芪糖蛋白。