[發(fā)明專利]使用免疫球蛋白片段的促胰島素綴合物

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310309673.0
• 申請日: 2008-01-04
• 公開（公告）號: CN103435700A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 宋大海;林昌基;宋臺憲;金永勳;權(quán)世昌;李寬淳;鄭圣燁;崔仁榮
• 申請（專利權(quán)）人: 韓美科學(xué)株式會社
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;A61K47/48;A61K38/22;A61P3/10;A61P3/04;A61P15/00;A61P9/10
• 代理公司: 廣州華進(jìn)聯(lián)合專利商標(biāo)代理有限公司 44224
• 代理人: 鄭小粵

本申請是于2008年1月4日提交的申請?zhí)枮?008800017664，發(fā)明名稱為“使用免疫球蛋白片段的促胰島素綴合物”的發(fā)明專利申請的分案申請。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種用于促胰島素肽的長效配方的促胰島素肽綴合物。具體地，本發(fā)明涉及一種顯著提高體內(nèi)功效持續(xù)時(shí)間的改良的促胰島素肽的綴合物，該肽綴合物是通過將促胰島素肽和非肽聚合物以及免疫球蛋白Fc共價(jià)連接產(chǎn)生的，以及本發(fā)明還涉及該肽綴合物的制備方法。

背景技術(shù)

肽由于它們的低穩(wěn)定性而容易變性，由體內(nèi)的蛋白水解酶降解，從而失去活性，并且肽具有相對較小，從而容易通過腎。因此，為了保持血液濃度和包括作為藥物有效成分的肽的藥物濃度，必須給病人頻繁地服用肽類藥物來保持所需要的血液濃度和藥物濃度。然而，該肽類藥物通常以注射劑的形式給藥，而這樣頻繁的給藥使得病人很痛苦。為解決這些問題，已經(jīng)進(jìn)行了許多努力。作為其中的一種努力，已經(jīng)嘗試通過生物膜增加肽類藥物的傳送以通過口咽或鼻咽吸入來運(yùn)送肽類藥物。然而，與注射相比，由于體內(nèi)的傳送效率低，這種方法仍然很難保持該肽類藥物的體內(nèi)活性。

另一方面，已經(jīng)進(jìn)行了很多努力來改善肽類藥物的血液穩(wěn)定性，并將藥物在血液中以高濃度保持長時(shí)間，從而使該藥物的藥效最大化。因此，這種肽類藥物的長效制劑需要增加肽類藥物的穩(wěn)定性，并保持不會引起病人免疫反應(yīng)的足夠高濃度的藥物濃度。

作為穩(wěn)定肽并抑制它通過蛋白水解酶降解的方法，已經(jīng)進(jìn)行了一些實(shí)驗(yàn)來修飾對該蛋白水解酶敏感的特定氨基酸序列。例如，由于GLP-1(7-37或7-36酰胺)通過二肽基肽酶IV（DPP?IV）在第8氨基酸（Ala）和第9氨基酸（Asp）之間進(jìn)行剪切而損失了GLP-1的藥物濃度，因此具有減少血液中葡萄糖濃度以治療2型糖尿病作用的GLP-I(7-37或7-36酰胺)具有4分鐘或更短的生理活性的半衰期（Kreymann等，1987）。因此，已經(jīng)進(jìn)行了各種關(guān)于具有抗DPP?IV的GLP-I類似物的研究，并且已經(jīng)進(jìn)行了用Gly取代Ala（Deacon等，1998；Burcelin等，1999）或用Leu或D-Ala取代Ala（(Xiao等，2001)）的實(shí)驗(yàn)，從而在保持它的活性的同時(shí)增加了對DPP?IV的抗性。GLP-1的N末端氨基酸，His⁷對GLP-1的活性是重要的，并且作為DPP?IV的目標(biāo)。因此，美國專利第5，545，618號描述了用烷基或酰基修飾N末端，并且Gallwitz等描述了第7位His進(jìn)行N甲基化或а甲基化，或者整個(gè)His用咪唑取代來增加對DPP?IV的抗性并保持生理活性。

除了這些修飾，從希拉毒蜥蜴的唾液腺純化的GLP-1類似物exendin-4（美國專利第5，424，686號）具有對DPP?IV的抗性并比GLP-I具有更高的生理活性。因此，它具有比GLP-1的半衰期更長的2至4小時(shí)的體內(nèi)半衰期。然而，僅使用增加DPP?IV抗性的方法，生理活性不能被充分地保持，并且在使用商業(yè)可獲得的exendin-4（exenatide）的情況下，它需要一天兩次被注射給病人，這對病人仍然是很痛苦的。

這些促胰島素肽具有一個(gè)問題，通常肽的大小很小。從而，它們不能在腎中被重新獲得，并且它們隨后被排出體外。因此，已經(jīng)使用以化學(xué)方法在肽的表面添加例如聚乙二醇（PEG）的具有高溶解度的聚合物來抑制在腎中的損失的方法。

PEG非特異性地結(jié)合到特異位點(diǎn)或目標(biāo)肽的多個(gè)位點(diǎn)產(chǎn)生了增加肽的分子量的效果，并從而抑制通過腎的損失，并防止水解，而不產(chǎn)生任何的副作用。例如，國際專利公開第WO2006/076471號申請描述了PEG結(jié)合到B型利鈉肽或BNP,BNP結(jié)合到NPR-A激活cGMP的產(chǎn)生，cGMP使得動脈血壓降低，并因此作為充血性心力衰竭的治療劑，從而保持生理活性。美國專利第6，924，64號描述了PEG結(jié)合到exendin-4的賴氨酸殘基來增加它的體內(nèi)停留時(shí)間。然而，這種方法增加了PEG的分子量，從而增加了肽類藥物的體內(nèi)停留時(shí)間，同時(shí)隨著分子量的增加，該肽類藥物的濃度顯著地減少了，并且肽的反應(yīng)性也降低了。因此，產(chǎn)量被不希望的降低了。