[發明專利]一種牛乳源金黃色葡萄球菌Efb蛋白及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201310309369.6
• 申請日: 2013-07-23
• 公開（公告）號: CN103360479A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發明（設計）人: 蘇艷;劉云濤;韋海娜;姜慧嬌;張寶江
• 申請（專利權）人: 新疆農業大學
• 主分類號: C07K14/31
• 分類號: C07K14/31;C12N15/70;A61K39/085;A61P31/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種由牛乳源金黃色葡萄球菌分泌的細胞外纖維蛋白原結合蛋白Efb。

2.根據權利1要求所述的蛋白，其特征在于該蛋白的基因是以分離的牛乳源金黃色葡萄球菌基因組DNA為模板，利用自行設計的一對特異性引物，上游引物：5’-GCGGAATTCCCAGCGAAGGATACGG-3’；下游引物：5’-TATTCTCGAGTTCTCACTAATCC-3’.經該引物的擴增得到426bp的Efb擴增產物。

3.根據權利要求1所述的該Efb蛋白具有如序列表1所示的氨基酸序列，該序列為特定地區流行菌株的獨特序列。

4.根據權利要求1所述的蛋白，其特征在于該Efb基因可位于任何原核表達載體中，包括但不限于pET-28a，pET-30a，pET-32a，pET-240a，pGEX-6p-1pGEX-4T-2等載體。

5.根據權利要求1要求所述的蛋白，其特征在于該Efb基因利用自行設計引物連接至表達載體pET-28a中：正向引物：5’-GCGGAATTCAGCGAAGGATACGGT-3’；反向引物：5’-TATTCTCGAGTAGTTCTCACT-3’。再將該表達載體轉化至大腸桿菌BL21中進行誘導表達及純化，純化后的表達蛋白大小為24Kd左右。

6.根據權利要求2所述的蛋白，還包括該蛋白的誘導及純化方法。

7.根據權利要求3所述的蛋白，還涉及該蛋白用于生產疫苗的用途。