[發明專利]藏茵陳藥材中獐牙菜醇苷化學對照品的制備方法

有效

• 申請號: 201310308051.6
• 申請日: 2013-07-22
• 公開（公告）號: CN103408615A
• 公開（公告）日: 2013-11-27
• 發明（設計）人: 陳晨;陳濤;李玉林;孫菁
• 申請（專利權）人: 中國科學院西北高原生物研究所
• 主分類號: C07H17/04
• 分類號: C07H17/04;C07H1/08
• 代理公司: 蘭州中科華西專利代理有限公司 62002
• 代理人: 李艷華

技術領域

本發明涉及一種化學對照品的制備方法，尤其涉及藏茵陳藥材中獐牙菜醇苷化學對照品的制備方法。

背景技術

藏茵陳為治療肝炎、膽囊炎及利膽退黃等肝膽系統疾病的一類著名藏藥材，其主要活性成分為環烯醚萜類和口山酮類化合物，口山酮類化學物具有中樞神經系統興奮和抑制、利尿、強心等作用及解肝毒、保肝、抗炎、抗病毒等活性。7-O-[α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖]-1,8-二羥基-3-甲氧基口山酮（7-O-[α-L-?rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-xylopyranosyl]-1,8-?dihydroxy-3-methoxyxanthone）或被命名為獐牙菜醇苷（Swertioside），是藏茵陳藥材中一種口山酮苷類成分，為藏茵陳治療肝炎的活性成分之一，其化學結構如下：

目前報道的獐牙菜醇苷的制備方法主要采用柱層析法，尚無有關獐牙菜醇苷制備方法的公開專利。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種工藝簡單、重復性高、回收率高的藏茵陳藥材中獐牙菜醇苷化學對照品的制備方法。

為解決上述問題，本發明所述的藏茵陳藥材中獐牙菜醇苷化學對照品的制備方法，包括以下步驟：

⑴制備提取物浸膏：

將藏茵陳藥材以1?g：5?mL?~30?mL的比例用體積濃度為5~95%的乙醇或體積濃度為5~100%的甲醇在提取溫度為60~95℃、提取次數1~4次、每次1~4?h的條件下進行加熱回流提取，合并提取液；所述提取液在壓力為0.02~0.07MPa條件下經減壓濃縮后得到藏茵陳提取物浸膏；?

⑵萃取：

將所述藏茵陳提取物浸膏用其質量的1~10倍去離子水溶解后，依次用氯仿、正丁醇進行萃取，分別得到氯仿部位、正丁醇部位和水部位；

⑶所述正丁醇部位干燥至恒重后，得到正丁醇部位干燥粉末；

⑷分離制備富含獐牙菜醇苷的餾分：

將所述正丁醇部位干燥粉末用其質量的1~10倍的體積濃度為5~100%的甲醇或體積濃度為5~95%的乙醇溶解，然后注入到制備型高效液相色譜中，依次用體積濃度為60%的甲醇溶液及體積濃度為70~100%的甲醇溶液進行洗脫，并采用200?nm~400?nm的檢測波長進行在線紫外檢測，收集體積濃度為70~100%的甲醇溶液中含有的獐牙菜醇苷的洗脫液A；所述洗脫液A在壓力為0.02~0.07MPa條件下經濃縮干燥至恒重后得到富含獐牙菜醇苷的餾分，此時化學物純度>80%；

⑸純化：

將所述富含獐牙菜醇苷的餾分用其質量的1~10倍的體積濃度為100%的甲醇溶解后，上樣到凝膠分離柱中，并采用體積濃度為100%的甲醇溶液進行洗脫，得到洗脫液B；該洗脫液B在壓力為0.02~0.07MPa條件下經濃縮干燥至恒重后得到純度>98%的富含獐牙菜醇苷的餾分，即得獐牙菜醇苷化學對照品。

所述步驟⑴中藏茵陳藥材是指川西獐牙菜或抱莖獐牙菜。

所述步驟⑶中的干燥是指冷凍干燥、噴霧干燥、烘箱干燥中的一種。

所述冷凍干燥的條件是指冷肼溫度為-20~-50℃，真空度為20Pa~50?Pa。

所述噴霧干燥的條件是指入料流量為200~1000?mL/h，入料溫度為30~70℃，進風溫度為170~210℃，進風量為16~28?m³/h。

所述烘箱干燥的溫度為40~70℃。

所述步驟⑷中的洗脫條件是指洗脫流速為60?mL/min~200?mL/min，洗脫體積為色譜柱體積2~10倍。

所述步驟⑷中的制備型高效液相柱為市售產品，且其填料為C₈或C₁₈鍵合相填料，填料粒徑為5~20um。

所述步驟⑸中的洗脫條件是指洗脫流速為0.2?mL/min~5?mL/min，洗脫體積是色譜柱體積2~10倍。

所述步驟⑸凝膠分離柱中的凝膠填料為Sephadex?LH-20。

本發明與現有技術相比具有以下優點：

1、由于本發明采用制備高效液相與凝膠色譜相結合的分離純化技術手段，獲得純度大于98%的獐牙菜醇苷，具有所用試劑量少、操作簡單方便、回收率高，精密度高、穩定性好、重復性等特點，因此，適宜產業化生產。

2、由于本發明采用制備型高效液相色譜為分離手段，在保證高效分離的前提下，提高了獐牙菜醇苷化學品產量，可以獲得克級純度在98%以上的化學對照品。