[發明專利]一種綠針假單胞菌及其發酵培養方法

有效

• 申請號: 201310307236.5
• 申請日: 2013-07-19
• 公開（公告）號: CN103333845A
• 公開（公告）日: 2013-10-02
• 發明（設計）人: 龔新進;馮鎮泰;張紅艷;沈麗娟;王香秀;張進武
• 申請（專利權）人: 上海農樂生物制品股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01P3/00;C12R1/38
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 蔣亮珠

1.一種綠針假單胞菌，其特征在于，該綠針假單胞菌，在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCC?No.6773。

2.一種權利要求1所述的綠針假單胞菌的發酵培養方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

1)將經活化的綠針假單胞菌nlsy001接種到該菌專用發酵培養基中，在26-28℃、pH6.5-7.2下培養18-28小時，得到種子液；

2)將步驟1)制備的種子液接種到該菌專用發酵培養基中，在26-28℃、pH6.5-7.2下通氣培養；

所述步驟1)和步驟2)中專用發酵培養基配方為：每1000毫升水中含玉米粉10-15克，豆餅粉30-40克，K₂HPO₄0.1-0.2克，KH₂PO₄0.15-0.25克，MgSO₄0.4-0.5克，起始pH6.5-7.5。

3.根據權利要求2所述的培養綠針假單胞菌的方法，其特征在于，步驟1)中對綠針假單胞菌nlsy001菌株進行活化的方法為：將該綠針假單胞菌nlsy001菌株接種到KB培養基中，在26-28℃下培養18-28小時；所述KB的配方為：每1000毫升水中含含蛋白胨20克、甘油15毫升、K₂HPO₄0.392克和MgSO₄0.732克，pH為6.5-7.5。

4.根據權利要求2所述的培養綠針假單胞菌的方法，其特征在于，所述的綠針假單胞菌nlsy001專用發酵培養基配方為：每1000毫升水中含玉米粉10克，豆餅粉35克，K₂HPO₄0.15克，KH₂PO₄0.2克，MgSO₄0.4-0.5克，起始pH6.5-7.5。

5.根據權利要求2所述的培養綠針假單胞菌的方法，其特征在于，步驟1)中的接種比例為2-5％，培養條件為在26℃、pH6.8、220rpm下震蕩培養；步驟2)中的接種比例為6-8％，通氣量以發酵液與每分鐘通氣量體積比計為1∶0.2-0.4，培養所用培養罐的罐壓為1.2-1.8F/cm²，培養罐帶有攪拌裝置，攪拌速度為180-240rpm，培養時間為24-48小時。

6.根據權利要求2所述的培養綠針假單胞菌的方法，其特征在于，步驟2)的發酵培養條件為在26℃、pH6.8下進行，培養時間為36-48小時。

7.一種權利要求1所述的綠針假單胞菌的應用，其特征在于，以綠針假單胞菌nlsy001CGMCC?No6773為活性成分的菌劑。

8.根據權利要求7所述的綠針假單胞菌的應用，其特征在于，將綠針假單胞菌nlsy001CGMCC?No6773的發酵液與干燥無菌的填充料按重量比5-10∶1混合后，壓濾，再遮蔭風干，得到綠針假單胞菌nlsy001CGMCC?No6773菌劑；所述填充料為草炭或硅藻土，細度為150-250目。

9.根據權利要求7所述的綠針假單胞菌的應用，其特征在于，所述得到的菌劑為150-250目的草炭、硅藻土或高嶺土調整至最終的含水量為35％以下。