[發(fā)明專利]Miltenberger血型抗體檢測新方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310305919.7 | 申請日: | 2013-07-19 |
| 公開(公告)號: | CN103344772A | 公開(公告)日: | 2013-10-09 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 丁少華;李勇;王紅梅;段生寶;田晶晶;陳曄洲;李冬 | 申請(專利權(quán))人: | 中國科學(xué)院蘇州生物醫(yī)學(xué)工程技術(shù)研究所 |
| 主分類號: | G01N33/68 | 分類號: | G01N33/68;G01N33/555 |
| 代理公司: | 蘇州廣正知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32234 | 代理人: | 劉述生 |
| 地址: | 215163 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | miltenberger 血型 抗體 檢測 新方法 | ||
1.一種非紅細(xì)胞依賴型Miltenberger血型抗體檢測方法,其特征在于,包括步驟為:(1)將羊紅細(xì)胞醛化磁化后與具有連接鏈的多肽抗原偶聯(lián)形成人工篩查細(xì)胞;(2)將所述人工篩查細(xì)胞與檢測樣本混勻后孵育并洗滌,再加入熒光標(biāo)記二抗孵育并洗滌后測定結(jié)果。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法,其特征在于,所述醛化過程是用戊二醛醛化,所述磁化過程是用磁珠磁化。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法,其特征在于,所述連接鏈的氨基酸序列為GGDGDGDGDG。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法,其特征在于,所述偶聯(lián)的過程為將所述醛化磁化羊紅細(xì)胞稀釋至體積分?jǐn)?shù)為30-70%,將所述多肽抗原配制濃度為1-5?mg/mL,再將所述醛化磁化羊紅細(xì)胞和所述多肽抗原用滾軸儀在轉(zhuǎn)速為100-300?rpm的條件下混合偶聯(lián)3-6?h,得到人工篩查細(xì)胞。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法,其特征在于,所述檢測樣本包括待檢樣本、陰性樣本、陽性樣本和空白樣本。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法,其特征在于,所述人工篩查細(xì)胞與所述檢測樣本的體積比為1:1-3。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法,其特征在于,所述熒光標(biāo)記二抗中用于標(biāo)記的熒光素為花青素Cy系列熒光素或Alexa?Fluor系列熒光素。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法,其特征在于,步驟(2)中所述加入熒光標(biāo)記二抗孵育后的洗滌次數(shù)為2-4次。
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