[發(fā)明專利]一種用于系統(tǒng)性紅斑狼瘡的早期診斷的檢測(cè)試劑盒

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310305641.3
• 申請(qǐng)日: 2013-07-19
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104293901A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-01-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉驍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 金弗康生物科技(上海)有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種用于系統(tǒng)性紅斑狼瘡的早期診斷的檢測(cè)試劑盒，其特征在于：同時(shí)檢測(cè)人CR2基因5’UTR區(qū)rs3813946和第10外顯子上rs17615和rs104897三個(gè)SNP位點(diǎn)。

2.包含如下引物：

擴(kuò)展引物：

rs17615-F正向引物:?5'??TGGAACCACGGTCACTTACA??3'

rs17615-R反向引物:?5'??TGGGTGGGAGATAATAAACAAG??3'???

rs3813946-F正向引物:?5'??GAGCCAAGAAAACCCCGAG??3'

rs3813946-R反向引物:?5'??TGTAGTGGGTTGCGTGGTCA??3'???

測(cè)序引物：

rs17615-F?正向引物:?5'??TGGAACCACGGTCACTTACA??3'

rs3813946-F反向引物:?5'??GAGCCAAGAAAACCCCGAG??3'

根據(jù)權(quán)利要求1?所述的試劑盒檢測(cè)人CR2基因5’UTR區(qū)和第10外顯子突變的方法，包括如下步驟：

（1）樣本DNA提取；

（2）使用權(quán)力要求1所示試劑盒中的擴(kuò)增引物（SEQ?NO1，SEQ?NO2，SEQ?NO3，SEQ?NO4）對(duì)目的基因片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增；

（3）對(duì)步驟（2）所得PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化處理；

（4）將步驟（3）所得的純化產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序；

（5）結(jié)果分析。

3.根據(jù)權(quán)利要求2?所述的檢測(cè)人CR2基因5’UTR區(qū)和第10外顯子突變的方法，其特征在

于，PCR反應(yīng)體系：10mM的dNTP混合液2μl；5U/μl的Taq?DNA聚合酶1μl；Taq?Buffer?10μl,特異引物各1μl；25mM的MgCl_2?10μl；無(wú)菌去離子水73μl；

根據(jù)權(quán)利要求3?所述的檢測(cè)人CR2基因5’UTR區(qū)和第10外顯子突變的方法，其特征在于，

所述的PCR?擴(kuò)增條件為94?～?96℃?3?分鐘預(yù)變性；92?～?94℃?30秒變性、55?～?60℃?35?秒退火，72℃40秒延伸，72℃5分鐘延伸修復(fù)；重復(fù)30?～?35?個(gè)循環(huán)；最后37℃保溫。

4.檢測(cè)人CR2基因5’UTR區(qū)和第10外顯子突變的試劑盒在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中的應(yīng)用。