[發明專利]一種制備高純度L-辛弗林的方法

有效

• 申請號: 201310305483.1
• 申請日: 2013-07-13
• 公開（公告）號: CN103387501A
• 公開（公告）日: 2013-11-13
• 發明（設計）人: 顏李秀;周小華;莫卓群;馮琳;萬玉萍
• 申請（專利權）人: 湖南鑫利生物科技有限公司;重慶大學
• 主分類號: C07C215/60
• 分類號: C07C215/60;C07C213/10
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一、技術領域

本發明屬于L-辛弗林分離純化的技術領域，具體涉及采用超濾、樹脂吸附和反滲透技術分離純化L-辛弗林的方法。

二、背景技術

L-辛弗林，別名對羥福林、脫氧腎上腺素，是屬于麻黃堿類、無副作用的天然興奮劑，具有氧化脂肪、增加能量消耗減肥功能，具有收縮血管、升高血壓、擴張氣管和支氣管、調節胃腸運動的作用，用于抗休克，治療支氣管哮喘和胃下垂等，在醫藥、保健品、食品、飲料等行業有廣泛應用前景。

L-辛弗林既可化學合成又可從植物中提取，化學合成的路線有氨基乙氰法和直接?；?，獲得的產物為DL-外消旋體，由于D-對映體可能存在副作用且難以分離，致使化學合成L-辛弗林受到嚴重制約。因而，從植物中提取分離成為制備L-辛弗林的唯一方法。L-辛弗林存在于酸橙和柑橘的干燥幼果枳實、青皮等植物中，含量僅為0.28-2.53％。目前，市售的L-辛弗林產品純度低，雜質多，不能應用于醫藥等高附加值領域。因此，研發出制備高純度L-辛弗林成為本領域的關鍵。

現有分離L-辛弗林的方法，如2010年8月4日公開的公開號為CN101792394A的“一種萃取分離L-辛弗林的方法”專利，公開的方法是：以市售枳實為原料，經溶解及抽濾、超濾分離、反膠束萃取、反萃取、真空濃縮及凍干而得成品。該方法的缺點是：萃取的原理是基于正負電荷的相互作用，而L-辛弗林溶液中含有氨基酸、維生素等帶正電荷的小分子，在實際生產過程中也被萃取，難以除去；該方法以真空濃縮方法來除去溶劑，達到提升L-辛弗林濃度的目的，但L-辛弗林為熱敏性化合物，真空濃縮時一般需要將物料加熱到65℃以上，此時，L-辛弗林已經開始氧化失效，因此，該法難以獲得高純度、高品質的產品。

又如2009年4月8日公開的公開號為CN101402577的“從個青皮中提取分離左旋-辛弗林的方法”專利，公開的方法是：用15～45％乙醇于80℃條件下回流提取個青皮細粉中左旋-辛弗林兩次，將提取液減壓濃縮至含固形物80～85％后上D101大孔吸附樹脂柱，用15％乙醇洗脫；將洗脫液減壓濃縮，噴霧干燥，得左旋-辛弗林粗品；用純乙酸溶解左旋-辛弗林粗品，加入與粗品等質量的硅膠，攪拌均勻，去除乙醇，制備硅膠吸附樣品，干法上樣，按體積比用二氯甲烷∶甲醇∶氨水＝6～9∶2∶0.1配制的洗脫液洗脫收集左旋-辛弗林組分；將硅膠柱分離洗脫的左旋-辛弗林組分進行減壓濃縮，噴霧干燥，獲左旋-辛弗林產品。該方法的主要缺點是：含固形物80～85％的提取液流動性極差，需要洗脫液體積大，硅膠高溫再生時耗能大，重復使用性差；使用二氯甲烷等有毒有機溶劑，污染嚴重，生產的安全性差；此外，在高溫下進行減壓濃縮及噴霧干燥，可能導致熱敏性的左旋-辛弗林大量氧化而失效，因此，獲得的產品質量差。

三、發明內容

本發明的目的是針對現有制備L-辛弗林方法的不足之處，提供一種制備高純度L-辛弗林的新方法，具有在常溫下實施對L-辛弗林高效分離純化，操作簡單，產品純度高，溶劑可循環使用，成本低，無“三廢”排放等特點。

本發明的主要機理：L-辛弗林和鹽酸結合形成的鹽酸鹽易溶于水，橙皮苷等物質則不溶解，因此可用鹽酸水溶液從枳實中提取，獲得L-辛弗林提取液；超濾是根據分子直徑差異實現物理分離，L-辛弗林是小分子，分子量僅為167.21，多糖、蛋白質等為大分子，分子量高達數萬或數十萬，故可以利用超濾使L-辛弗林透過超濾膜，而多糖、蛋白質等大分子被截留而與L-辛弗林分離；脫除多糖、蛋白質等大分子的L-辛弗林溶液中尚含有黃色素，該黃色素不帶電荷，可與大孔吸附樹脂結合，而L-辛弗林含亞氨基，接受質子即成為下離子，不能與吸附樹脂結合，將該溶液用大孔吸附樹脂處理，即可脫去黃色素；脫去黃色素的L-辛弗林溶液中還存在寡糖，由于寡糖不溶于乙醇等有機溶劑，所以，向脫去黃色素的L-辛弗林溶液中加入適量乙醇，則寡糖沉淀析出，過濾除去寡糖，再低溫減壓濃縮回收乙醇，得到除寡糖的L-辛弗林；L-辛弗林為酚類化合物，在高溫下極易氧化，將分別脫去多糖、蛋白質等大分子、脫去黃色素和寡糖的L-辛弗林溶液進行反滲透膜濃縮，無機鹽等小分子荷電雜質通過反滲透膜，L-辛弗林的相對分子量為167.21，則被截留下來，形成辛弗林濃縮液，最后對濃縮液進行冷凍干燥，即制備出高純度L-辛弗林凍干粉。

本發明的目的是這樣實現的：一種制備高純度L-辛弗林的方法，以市售枳實為原料，經溶解及抽濾、超濾除糖和蛋白質、大孔吸附樹脂脫色、乙醇除寡糖、反滲透膜濃縮、冷凍干燥，制得L-辛弗林粉末。其具體的方法步驟如下：

(1)制備L-辛弗林原料液