[發(fā)明專利]一種人雌二醇（E2）的磁微粒化學發(fā)光免疫分析試劑盒及其檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310301550.2
• 申請日: 2013-07-17
• 公開（公告）號: CN103344774A
• 公開（公告）日: 2013-10-09
• 發(fā)明（設計）人: 夏振偉;丁建華;余衛(wèi)國;楊旻
• 申請（專利權）人: 江陰澤成生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/74
• 分類號: G01N33/74
• 代理公司: 北京金智普華知識產權代理有限公司 11401
• 代理人: 巴曉艷

1.一種人雌二醇即E2的磁微粒化學發(fā)光免疫檢測試劑盒，其特征在于：待測樣本、校準品或質控品中的E2與酶標記的E2衍生物競爭結合異硫氰酸熒光素（FITC）標記的E2單克隆抗體，隨后加入連有抗熒光素抗體的磁微粒，通過抗熒光素抗體與熒光素的特異性結合使抗原抗體復合物連接在磁微粒上；所述的酶標記E2衍生物中使用的酶是堿性磷酸酶AP；所述的酶標試劑的偶聯(lián)方法是將N-琥珀酰胺3-（2-吡啶二巰基）丙酸[SPDP]活化的E2衍生物與Traunt’s試劑活化的堿性磷酸酶以1:0.5-2的比例混合，并用凝膠層析柱分離純化；所使用的底物溶液為含Lumigen?APS-5發(fā)光液的緩沖液。

2.如權利要求1所述的E2磁微粒化學發(fā)光免疫分析試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括：磁微粒試劑；E2校準品；E2質控品；E2抗試劑；E2衍生物；清洗濃縮液；發(fā)光底物溶液；樣本稀釋液；

所述的磁微粒試劑為連接羊抗FITC抗體的磁微粒溶液；

所述的校準品及質控品為含有一定量E2抗原的BSA緩沖液；

所述的抗試劑是異硫氰酸熒光素（FITC）標記的E2單克隆抗體液；

所述的E2衍生物是堿性磷酸酶（AP）標記的E2衍生物；

所述的清洗濃縮液是含有Tris、NaCl和表面活性劑等的緩沖液；

所述的發(fā)光底物溶液是含Lumigen?APS-5發(fā)光液的緩沖液；

所述的樣本稀釋液是含有BSA的溶液。

3.如權利要求1-2中任一項所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的使用方法如下：

（1）加樣與免疫反應：在每一平底試管中加入30μl?E2校準品、質控品或待測樣本；60μl抗試劑，混勻后，37℃溫育20分鐘；60μl酶標記E2衍生物，混勻后，37℃溫育20分鐘；加入60μl?磁微粒試劑，混勻后，37℃溫育5分鐘；

（2）洗滌：將平底試管在磁分離器上靜置2分鐘，然后弧線傾倒上清液，將試管及磁分離器一同倒置在吸水紙上拍干；每管中加入300μl清洗液，混勻后，將平底試管在磁分離器上靜置2分鐘，然后弧線傾倒上清液，將試管及磁分離器一同倒置在吸水紙上拍干；重復兩次；

（3）加入發(fā)光底物溶液：每個試管加入200μl發(fā)光底物；

（4）讀取發(fā)光值：用化學發(fā)光儀測定每管的發(fā)光值。

4.???如權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述待測樣本為高值HOOK樣本時，根據需要使用樣本稀釋液對樣本進行稀釋。