[發明專利]利用根快速繁殖雜交蘭的方法及培養基

有效

• 申請號: 201310299505.8
• 申請日: 2013-07-16
• 公開（公告）號: CN103329807A
• 公開（公告）日: 2013-10-02
• 發明（設計）人: 張建軍;周音;陳敏敏;謝紀紅
• 申請（專利權）人: 上海市農業科學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海漢聲知識產權代理有限公司 31236
• 代理人: 牛山;陳少凌

技術領域

本發明屬于植物組織培養技術領域，具體涉及一種利用根快速繁殖雜交蘭的方法及培養基。

背景技術

雜交蘭是由中國蘭與大花蕙蘭雜交選育出來的新型蘭花[陸繼亮.初探云南雜交蘭產銷現狀[J].花木盆景(花卉園藝)，2013，(2)：36-37；梁芳，崔波，馬杰，葉永忠.雜交蘭原球莖增殖及分化研究[J].安徽農業科學，2008，36(13)：5309-5310，5353]。雜交蘭花中型、色艷、清香、雅致，彌補了大花蕙蘭無香味的缺點，它們集大花蕙蘭的花大、色艷、花期長及中國蘭的幽香、典雅和韻味為一體，具有很高的觀賞價值和廣闊的市場前景[張先云，袁秀云，馬杰.雜交蘭的組織培養與快速繁殖技術研究[J].河南科學，2009，27(4)：419-421；陸然.云南雜交蘭熱銷[J].中國花卉園藝2012，(1)：18]。雜交蘭適應性強，一些早花品種能一年兩次開花，彌補了大花蕙蘭花期集中的不足。由于上述優點，雜交蘭深受種植者和消費者歡迎，近年來一直呈產銷兩旺態勢，發展迅猛[陸繼亮.初探云南雜交蘭產銷現狀[J].花木盆景(花卉園藝)，2013，(2)：36-37；陸然.云南雜交蘭熱銷[J].中國花卉園藝2012，(1)：18]。

傳統的分株繁殖周期長，速度慢，繁殖系數低，遠不能滿足雜交蘭產業化生產要求；因此，應用組織培養快速繁殖雜交蘭，對于雜交蘭的產業化開發具有重要意義。

雜交蘭攜帶有國蘭的遺傳因子，與大花蕙蘭、蝴蝶蘭等洋蘭相比組織培養難度較大，目前僅查到3篇關于雜交蘭組織培養快速繁殖的經典論文[梁芳，崔波，馬杰，葉永忠.雜交蘭原球莖增殖及分化研究[J].安徽農業科學，2008，36(13)：5309-5310，5353；張先云，袁秀云，馬杰.雜交蘭的組織培養與快速繁殖技術研究[J].河南科學，2009，27(4)：419-421；沈漢國，鄧櫻，楊鎮明，藍偉泉，羅麗霞.雜交蘭‘十八格格’組織培養研究.張啟翔.中國觀賞園藝研究進展[M].北京：中國林業出版社，2012：311-313]。

外植體以莖尖、側芽為主，對植株傷害大；外植體接種后易出現褐化，初始培養難度較大；培養過程復雜，繁殖系數低；是目前雜交蘭組織培養快速繁殖存在的主要問題。

用根作組織培養的外植體，具有取材量大、容易獲得、對植株傷害小的獨特優勢，但在目前的雜交蘭組織培養研究中未見用根作外植體的報道與發明專利。

發明內容

本發明的目的在于克服上述現有技術的不足，提供一種利用根快速繁殖雜交蘭的方法及培養基。具體為以根為外植體，在誘導培養基上誘導、增殖原球莖并使原球莖發育成叢生苗，快速繁殖雜交蘭；同時提出了各培養階段所需的特定培養基與培養技術。本發明所提供的雜交蘭根培養再生植株的方法，可一步完成原球莖的誘導、增殖和成苗過程；外植體的原球莖誘導率達100％，植株生根率100％，移栽成活率100％；具有繁殖系數高、成苗率高、移栽成活率高和成本低的特點。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現的：

第一方面，本發明涉及一種利用根快速繁殖雜交蘭的方法，包括如下步驟：

步驟一，選取雜交蘭的根段，接種在誘導培養基上暗培養，誘導、增殖原球莖；

步驟二，將所述誘導培養基上的原球莖轉入光培養，原球莖發育成叢生苗；

步驟三，將所述叢生苗切割成單苗轉接到壯苗生根培養基上，培養得到生根植株。

優選的，步驟一中的誘導培養基和步驟二中轉入光培養所用的培養基為同一種誘導培養基，所述誘導培養基為MS+6-BA0.5mg/L+PIC0.6mg/L+水解酪蛋白200mg/L+蔗糖30000mg/L+瓊脂粉5000mg/L。所述培養為暗培養，培養的溫度為25±2℃。

優選的，步驟二中，所述誘導培養基為MS+6-BA0.5mg/L+PIC0.6mg/L+水解酪蛋白200mg/L+蔗糖30000mg/L+瓊脂粉5000mg/L。所述培養為光培養，培養的溫度為25±2℃。

優選的，步驟三中，所述壯苗生根培養基為MS+AC100mg/L+水解酪蛋白500mg/L+蔗糖30000mg/L+瓊脂粉5000mg/L。所述培養為光培養，培養的溫度為25±2℃。

本發明還涉及一種誘導培養基，該培養基能夠誘導、增殖原球莖和使原球莖發育成叢生苗，所述誘導培養基為在MS基本培養基中同時添加6-BA和PIC。

優選的，所述誘導培養基為MS+6-BA0.5mg/L+PIC0.6mg/L+水解酪蛋白200mg/L+蔗糖30000mg/L+瓊脂粉5000mg/L。