[發明專利]利用花生粕制備強抗氧化肽的方法

有效

• 申請號: 201310291695.9
• 申請日: 2013-07-11
• 公開（公告）號: CN103392902A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發明（設計）人: 蘇國萬;趙謀明;孫為正;趙強忠
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: A23J1/14
• 分類號: A23J1/14;A23J3/14;A23J3/34
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 裘暉;郭煒綿

技術領域

本發明涉及花生粕的深加工技術，具體涉及一種利用花生粕制備強抗氧化肽的方法。

背景技術

中國是世界上重要的花生生產國之一，產量和出口量均占世界第一，其中有50-60%左右的花生用作榨油，每年產生的花生粕就高達400萬噸?；ㄉ芍泻?0-50%的蛋白質，其氨基酸組成比較合理，接近聯合國糧農組織（FAO）和世界衛生組織（WHO）的推薦值。但由于目前我國花生榨油主要是采用機械壓榨和有機溶劑浸出法相結合，提油后得到的花生粕由于蛋白質高度變性，營養功能性降低和風味劣變而限制其應用領域，大多用作飼料、肥料或燃料，產品附加值低，資源浪費嚴重。

肽是介于氨基酸與蛋白質之間的分子聚合物，然而其功能與蛋白質和氨基酸相距甚遠，不僅具有更佳的吸收機制，同時也具有蛋白質或其組成氨基酸所沒有的生理功能。如今，對生物活性肽的研究尤其是短肽的研究，已經成為肽類保健食譜和藥物的熱點。在眾多的生物活性肽中，抗氧化肽作為一種天然抗氧化劑，具有較好的抗氧化性和安全性，吸引了越來越多的關注。

花生粕富含蛋白質，是一種制備抗氧化肽的優質蛋白原料。但由于榨油工藝導致花生粕蛋白發生的高度變性以及纖維素含量極高，增加了其制備抗氧化肽的工藝難度。但經過科研工作者的不懈努力，近年來在利用花生粕制備抗氧化肽取得了一定的進展。

張友維采用微生物發酵法對花生粕中的蛋白進行生物降解制備生物活性肽，制得的抗氧化肽在肽含量為4.92mg/ml時，DPPH自由基清除力為54.58%，超氧陰離子自由基清除力為25.12%，還原力為30.8%，且發酵產物水解度達到21.41%。

申請號為201110356467.6，名稱為“一種利用花生粕厭氧發酵生產飼用花生肽的方法”的中國專利申請公開了利用乳桿菌、釀酒酵母和枯草桿菌對花生粕進行固態發酵，制備飼用花生肽，一方面降解花生粕中的黃曲霉毒素，另一方面獲得較多的活性肽，提高飼料的消化率。但由于發酵工藝繁瑣，且過程中容易引發安全隱患，難以實現大規模生產。

利用生物酶制劑降解蛋白質制備生物活性肽不僅安全性較高、條件溫和，且水解過程容易控制。因此近年來普遍采用酶解方法制備生物活性肽。

如毛曉宇等人用木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、Alcalase蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶對花生粕進行酶解，并篩選出可獲得不同生物活性花生肽的最佳酶制劑。

王建化通過對比Alcalase和Neutrase蛋白酶的花生粕酶解特性，發現Alcalase具有更好的酶解效果，制得的花生肽具有明顯的抗氧化活性，5%的花生抗氧化活性肽抗氧化效果與3%的VE抗氧化效果相當。

采用酶解法雖可大規模制備抗氧化肽，但由于花生粕蛋白發生了高度變性，蛋白內部二硫鍵增加，疏水值升高，同時纖維素含量較高，限制其水解效率，蛋白回收率低下，增加了花生抗氧化肽的生產成本。

發明內容

本發明的目的在于提供一種利用花生粕制備強抗氧化肽的方法。為了克服現有的酶解花生粕制備抗氧化肽的方法中的難題，如由于蛋白內部二硫鍵增加、疏水值升高而導致水解效率低的問題，本發明采用微波加熱和有機酸對花生粕進行預處理，促使花生粕蛋白內部的二硫鍵轉化為巰基鍵，暴露更多的酶解位點，有利于酶解的進行。同時，采用表面活性劑協同酶解，進一步提高酶解效率。

本發明的目的通過下述技術方案實現：

一種利用花生粕制備強抗氧化肽的方法，包括以下步驟：

（1）原料的預處理：按重量取1份花生粕和1-2份酸性緩沖液混勻，通過微波加熱，并過打粉機得到粉狀花生粕；

（2）花生粕的表面活性劑輔助酶解：加入粉狀花生粕質量5-8倍的水，添加蛋白酶和纖維素酶，再加入表面活性劑，在45-60℃下水解，當水解度達到5-10%時，滅酶，離心分離，得到的上清液為富含抗氧化肽的花生粕酶解液；以粉狀花生粕的質量為計算基準，蛋白酶的加入量占1.0-1.5%，纖維素酶的加入量占0.6-0.8%，表面活性劑的加入量占0.03-0.05%；

（3）膜分離-乙醇聯用分離富集抗氧化肽：往花生粕酶解液中加入乙醇溶液，攪拌均勻；通過膜通量10000Da的超濾膜，收集透過液，再通過膜通量1000Da的超濾膜，收集截留液，得到花生肽溶液；噴霧干燥，得強抗氧化肽。

步驟（1）所述的酸性緩沖液為有機酸緩沖液，pH值為4.0-5.0；所述的有機酸是琥珀酸、檸檬酸或蘋果酸；

步驟（1）所述的微波加熱是在800-2000W下加熱60-200s。