[發明專利]一種體外構建三維立體組織的方法無效
| 申請號: | 201310291478.X | 申請日: | 2013-07-11 |
| 公開(公告)號: | CN104274864A | 公開(公告)日: | 2015-01-14 |
| 發明(設計)人: | 徐月敏;呂向國;馮超 | 申請(專利權)人: | 上海市第六人民醫院 |
| 主分類號: | A61L27/38 | 分類號: | A61L27/38;A61L27/36 |
| 代理公司: | 上海精晟知識產權代理有限公司 31253 | 代理人: | 馮子玲 |
| 地址: | 200233 *** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 體外 構建 三維立體 組織 方法 | ||
1.一種體外構建三維立體組織的方法,其特征在于,包括以下步驟:
步驟1,分離培養上皮細胞和肌細胞;
步驟2,將小腸黏膜下層脫細胞基質支架置入肌細胞懸液中,震蕩復合完成后,繼續培養;
步驟3,將上皮細胞懸液滴在經步驟2處理得到后的支架的肌細胞層上,繼續培養得到三維立體組織。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述肌細胞為骨骼肌細胞;所述上皮細胞為舌上皮細胞。
3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述三維立體組織為三維立體尿道組織。
4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟2中的震蕩復合在恒溫震蕩箱內進行,溫度為25-40℃,速度為50-150rpm/min,持續震蕩6-24h。
5.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟2中所述肌細胞懸液由步驟1得到的肌細胞消化調整密度為(0.5-5)×107/mL得到;步驟3中所述上皮細胞懸液由步驟1得到的上皮細胞消化調整密度為(0.2-3)×106/mL得到。
6.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟2中繼續培養時間為2-6d,每天換液;步驟3中繼續培養時間為2-6d,每天換液。
7.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟2中所述小腸黏膜下層脫細胞基質支架在使用前先進行消毒處理。
8.一種如權利要求1所述的方法構建的三維立體組織。
9.根據權利要求8所述的三維立體組織,其特征在于,所述三維立體組織為三維立體尿道組織。
10.權利要求8所述三維立體組織在尿道組織工程中的應用。
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