[發明專利]一種細胞趨化分析芯片、裝置、使用方法和制作方法

有效

• 申請號: 201310291183.2
• 申請日: 2013-07-11
• 公開（公告）號: CN103361263A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發明（設計）人: 羅春雄;楊薇;冉敏;歐陽頎
• 申請（專利權）人: 北京大學
• 主分類號: C12M1/34
• 分類號: C12M1/34;C12Q1/02
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 韓國勝

技術領域

本發明涉及生物學技術領域，特別涉及一種細胞趨化分析芯片、裝置、使用方法和制作方法。

背景技術

化學趨向性行為是一個基本的生命過程，對其研究不但有利于理解生物信號傳導響應機制，而且相關的生物傳感器開發也具有非常高的實用價值。然而當下研究手段依然比較落后，對于細胞的趨化研究手段，目前的實驗操作的難度較大，運用起來并不方便。

微流控技術是近幾年飛速發展的前沿學科，憑借其多元化、分析快、用量少、高通量和實時觀測等優點，現已成為生物細胞分析領域中一個強有力的研究手段。近來，微流控裝置（Erwin?Berthier,Jill?Surfus,James?Verbsky,Anna?Huttenlocher?and?David?Beebe,An?arrayed?high-content?chemotaxis?assay?for?patient?diagnosis,Integrative?Biology,2010,2,630-638.）也被廣泛用來研究動物細胞的趨化性，總體來說實驗操作難度也較大，而且也較難控制流體流動對趨化性行為本身的影響。

為了解決以上問題，本發明做了有益改進。

發明內容

（一）要解決的技術問題

本發明的目的是提供一種易于對細胞趨化進行觀測和分析的細胞趨化分析芯片。

本發明的另一個要解決的技術問題是提供一種包括有多個所述細胞趨化分析芯片的細胞趨化分析裝置。

本發明的另一個要解決的技術問題是提供一種所述細胞趨化分析芯片的使用方法。

本發明的另一個要解決的技術問題是提供一種所述細胞趨化分析芯片的制作方法。

（二）技術方案

本發明是通過以下技術方案實現的：

一種細胞趨化分析芯片，包括進液腔室、趨化通道、柵欄通道和吸液腔室；

所述進液腔室設有進液口，所述進液口用于加入細胞溶液；所述進液腔室用于容納加入的所述細胞溶液；

所述趨化通道的一端與所述進液腔室相連通，所述趨化通道的另一端與所述柵欄通道的一端相連通，所述趨化通道的內徑大于所述細胞溶液中所含細胞的直徑；

所述柵欄通道的內徑小于所述細胞溶液中所含細胞的直徑；所述柵欄通道的另一端與所述吸液腔室相連通；

所述吸液腔室用于吸收所述細胞溶液中的溶液。

進一步，所述趨化通道為多條。

進一步，所述每條趨化通道的內徑大于等于10微米小于等于100微米。

進一步，所述柵欄通道為多條。

進一步，所述每條柵欄通道的內徑大于等于0.1微米小于等于10微米。

對于細胞趨化分析裝置這一技術主題，本發明是通過以下技術方案實現的：

一種細胞趨化分析裝置，其上設有多個所述的細胞趨化分析芯片。

對于細胞趨化分析芯片的使用方法這一技術主題，本發明是通過以下技術方案實現的：

包括：

步驟A1，將所述細胞趨化分析芯片的內部抽成真空；

步驟A2，從所述進液口向所述細胞趨化分析芯片加入細胞溶液；所述細胞溶液在所述細胞趨化分析芯片內部的真空負壓作用下流入所述吸液腔室，所述細胞溶液中的細胞被所述柵欄通道擋在所述趨化通道內；

步驟A3，除去所述進液腔室內的細胞溶液；

步驟A4，從所述進液口加入趨化因子溶液；

步驟A5，將所述細胞趨化分析芯片放在顯微鏡下觀測。

進一步，所述步驟A4具體包括：

步驟A41，從進液口加入培養液；

步驟A42，將所述進液口覆蓋；

步驟A43，待細胞貼壁后，將所述進液口打開并加入趨化因子溶液。

對于細胞趨化分析芯片的制作方法這一技術主題，本發明是通過以下技術方案實現的：

步驟M1，在曝光掩膜上制出所述細胞趨化分析芯片形狀的透光部分；

步驟M2，將所述曝光掩膜覆蓋在涂有光刻膠的硅片上；

步驟M3，將所述硅片曝光，所述曝光掩膜的透光部分所對的光刻膠發生曝光反應并形成凸起；

步驟M4，去除所述涂有光刻膠的硅片上與所述曝光掩膜的不透光部分相對的未形成凸起的部分，得到用于制作所述細胞趨化分析芯片的陽模；

步驟M5，將用于制作所述細胞趨化分析芯片的澆鑄料澆鑄在所述陽模上；

步驟M6，將所述陽膜中的澆鑄料固化；

步驟M7，將固化后得到的產品貼合在襯底上，得到所述細胞趨化分析芯片。

（三）有益效果