[發明專利]防治蘋果果實輪紋病的生防菌婁徹氏鏈霉菌A-1及其生防制劑無效

申請號：	201310289746.4	申請日：	2013-07-11
公開（公告）號：	CN103789222A	公開（公告）日：	2014-05-14
發明（設計）人：	王彩霞;李桂舫;李保華;張清明;董向麗	申請（專利權）人：	青島農業大學
主分類號：	C12N1/20	分類號：	C12N1/20;A01N63/00;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/465
代理公司：	北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350	代理人：	湯東鳳
地址：	266000 山***	國省代碼：	山東;37
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摘要：
搜索關鍵詞：	防治蘋果果實輪紋病生防菌婁徹氏鏈霉菌及其制劑
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【說明書】：

技術領域

本發明涉及植物病害生物防治技術領域，特別涉及一種防治蘋果果實輪紋病的生防菌婁徹氏鏈霉菌A‐1及其生防制劑。

背景技術

蘋果是世界上食用最廣泛的的水果品種，同時也是我國的重要經濟作物和出口水果。中國蘋果產業在出口創匯、農業產業結構調整和增加農民收入等方面發揮了重要的戰略作用。我國的蘋果栽培面積和產量均居世界首位，然而，蘋果出口率不足總產量的3%，在國際上的市場占有率與我國蘋果生產大國的地位極不相稱，影響我國蘋果產業發展的一個重要因素就是儲藏期病害。我國蘋果因儲藏期病害每年損失10%～15%，降低5%可以減少27億元人民幣損失（農博網‐‐國家蘋果產業技術體系，2009），儲藏期病害還影響蘋果的長期儲藏和遠距離運輸。

由葡萄座腔菌Botryosphaeria?berengeriana引起的蘋果果實輪紋病是目前危害最大的果實病害之一，該病菌在7月份侵入果實，在樹上生長期間和儲藏、運輸過程中均會造成爛果，一般年份爛果率為20%～40%，大發生年份爛果率達60%以上。目前，化學藥劑處理是控制蘋果采后輪紋病的主要措施，化學藥劑的使用嚴重危害人類健康，污染生態環境，而且易引起病原菌的抗藥性，因此迫切需要尋找一種高效且無公害的防治方法，以有效微生物取代化學殺菌劑用于采后果蔬病害的防治已顯示出巨大的應用前景。

發明內容

本發明針對目前農業生產中蘋果儲藏期主要病害果實輪紋病防治難度大，成本高，化學農藥抗性日益突出，農藥殘留高等問題，篩選出一株高效生防菌株并制備生防制劑，對蘋果果實輪紋病進行有效防治。

本發明提供的技術方案是：

一種防治蘋果果實輪紋病的生防菌婁徹氏鏈霉菌（Streptomyces?rochei）A‐1，于2012年1月12日保藏于：中國典型培養物保藏中心，地址：中國.武漢.武漢大學，保藏號：CCTCC?NO:M2012008，經檢驗存活。

利用上述的婁徹氏鏈霉菌（Streptomyces?rochei）A‐1所制備的用于防治蘋果果實輪紋病的生防制劑。

本發明有益效果：

本發明婁徹氏鏈霉菌（Streptomyces?rochei）A‐1對蘋果果實輪紋病有顯著的防治效果，實施例的研究表明，本發明的生防菌株可顯著抑制蘋果輪紋病菌菌絲的生長，且婁徹氏鏈霉菌（Streptomyces?rochei）A‐1菌株的抑菌譜較廣，除蘋果輪紋病菌外，還對蘋果樹腐爛病菌、桃褐腐病菌及蘋果干腐病菌等多種果樹病原真菌具有顯著的拮抗作用。蘋果果實接種實驗表明，婁徹氏鏈霉菌（Streptomyces?rochei）A‐1的菌餅、發酵液和菌懸液對果實輪紋病的防治效果均在95%以上，與化學藥劑10%苯醚甲環唑Difenoconazole（世高）可濕性粉劑防效相當。

本發明所提供的生防制劑活性成分婁徹氏鏈霉菌（Streptomyces?rochei）A‐1具有防治效果穩定，對環境友好等特點，大規模生產的發酵工藝簡單、生產成本低廉。

本發明生防制劑在果樹病害的生物防治中具有持續有效、防治效果好、無污染、對人畜安全、無殘留、特異性強等優點，且有利于保護環境、保持生態平衡。

附圖說明

圖1.婁徹氏鏈霉菌A‐1對蘋果輪紋病菌菌絲生長的抑制作用；

圖中A為對峙培養7d的抑制情況；B為對峙培養1個月的抑制情況，左側培養皿為僅接種輪紋病菌的對照；

圖2.婁徹氏鏈霉菌A‐1的菌落形態圖；

圖中A為菌株A‐1菌落正面；B為菌株A‐1菌落背面；

圖3.婁徹氏鏈霉菌A‐1的孢子（絲）及菌絲形態圖；

C為菌株A‐1的孢子絲及孢子；D為菌株A‐1的菌絲；

圖4.婁徹氏鏈霉菌A‐116S?rDNA基因PCR擴增示意圖；

圖中M為核酸Marker?DL2000；1‐2分別為菌株A‐1基因組DNA稀釋100和50倍的擴增結果；

圖5.婁徹氏鏈霉菌A‐1對蘋果輪紋病菌菌絲形態的影響；