[發明專利]血紅蛋白及血紅蛋白衍生物的測定方法、測定試劑盒

無效

• 申請號: 201310288999.X
• 申請日: 2008-10-29
• 公開（公告）號: CN103353534A
• 公開（公告）日: 2013-10-16
• 發明（設計）人: 田中宏橋;田中正教;淺原千津;北脅文久
• 申請（專利權）人: 松下電器產業株式會社
• 主分類號: G01N33/72
• 分類號: G01N33/72;G01N33/531
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 馮雅

本發明專利申請是國際申請號為PCT/JP2008/003081，國際申請日為2008年10月29日，進入中國國家階段的申請號為200880025118.2，名稱為“血紅蛋白及血紅蛋白衍生物的測定方法、測定試劑盒”的發明專利申請的分案申請。

技術領域

本發明涉及血液試樣中的血紅蛋白及血紅蛋白衍生物的測定方法以及用于該方法的試劑組合物、測定試劑盒、分析器件及分析系統，涉及更加迅速且準確地測定血紅蛋白及血紅蛋白衍生物的技術。此外，本發明還涉及使生物學物質與蛋白質結合的方法。所得的配體-蛋白質復合物可用作免疫測定中的凝集試劑。

背景技術

作為血紅蛋白衍生物之一的血紅蛋白A1c因為可以排除進食對血糖值變化產生的影響來判定平時的血糖水平，因此是為了早期發現生活習慣病而經常測定的項目。血紅蛋白A1c是紅細胞中所含的血紅蛋白與葡萄糖結合而成的物質，以血紅蛋白A1c相對于血紅蛋白的存在比例(％)數值化。因此，為了測定血紅蛋白A1c的存在比例，需要分別測定血紅蛋白及血紅蛋白A1c。血紅蛋白的測定一般采用利用血紅蛋白特有的光吸收特性而以415nm附近的波長或540nm附近的波長進行測定的方法。作為以540nm附近的波長進行測定的方法，周知氰化正鐵血紅蛋白法和SLS血紅蛋白法。此外，為了用免疫法測定血紅蛋白A1c，需要以下的處理：通過使血液試樣溶血而從紅細胞中取出血紅蛋白后，為了判別血紅蛋白是非糖化血紅蛋白還是血紅蛋白A1c，通過改變血紅蛋白的立體結構而使血紅蛋白的被糖化了的部分從其立體結構中暴露至外部。該處理稱為變性。另外，還可以通過使其與特異性地識別被糖化了的部分的抗體反應，從而以免疫學的方式測定血紅蛋白A1c量。

還有，作為本發明的現有技術文獻，公開有國際公開第2006/112339號文本(WO2006/112339A1)，關于測定血紅蛋白A1c時的變性方法，其中也有記載。該方法是將含血液成分的試樣用非離子型表面活性劑和氧化劑處理而使所述試樣中的血紅蛋白變性的血紅蛋白衍生物的測定方法。

此外，近年來，在臨床檢查中，為了檢查各種疾病的發展程度，采用了各種各樣的檢查方法，可以使血液等生物學試樣與分析試劑反應來對生物學試樣中的各種成分進行定量的大型自動分析器件被實用化，變得在醫療領域中必不可少。在這樣的背景下，近年來市場上渴望出現實現低成本、試樣液的少量化、短時間測定、裝置的小型化、多項目同時測定等的更高精度且運用的自由度更高的分析裝置和分析方法。

作為運用的自由度高的分析裝置和分析方法之一，公知以抗原抗體反應為基礎的測定原理，有免疫比濁法、免疫散射比濁法、膠乳免疫凝集法、免疫凝集抑制法、膠乳免疫凝集抑制法、熒光免疫測定法、化學發光免疫測定法、電化學免疫測定法、熒光偏光免疫測定法、免疫色譜法等免疫測定法。

基于粒子凝集反應的免疫測定中，對于生物學試樣中的特定成分的定性或定量的測定根據游離狀態的抗分析對象抗體或與水懸浮性粒子結合的抗分析對象抗體的凝集的有無及其程度來判定。作為該水懸浮性粒子最普遍被使用的為被稱作膠乳粒子的物質。

基于粒子凝集反應的免疫測定中，已知利用免疫學粒子凝集抑制反應的測定方法。如果將抗分析對象抗體與對該抗體具有特異性的凝集試劑混合，則凝集試劑識別抗分析對象抗體而發生凝集，但如果其中存在分析對象，則該凝集受到抑制，所以通過以光學方式測定或計數該凝集的程度，則可以定量地檢測分析對象。該測定方法能夠適用于各種分析對象，可以廣泛應用。凝集反應中，凝集試劑的濃度對反應有較大的影響。

還有，作為關于免疫測定中使用的凝集試劑的現有技術文獻信息，已知配體-聚合物復合物的制造方法，一般被經常使用(例如參照日本專利特開平1-155272號公報)。具體來說，關于作為用于測定生物學試樣中的特定成分、特別是血紅蛋白A1c的凝集試劑的配體-聚合物復合物進行了公開，對使配體共價結合于聚天冬氨酸等聚合物材料上的配體-聚合物復合物進行了記載。圖14為現有的作為配體-聚合物復合物的凝集試劑的示意圖，現有的凝集試劑4由多肽(載體)5、連接物2、配體3形成。通過介以連接物2使多肽(載體)5與配體3結合而制成。

專利文獻1:國際公開第2006/112339號文本

專利文獻2:日本專利特開平1-155272號公報

發明的揭示