[發明專利]兩步法同時制備長梗冬青苷和紫丁香苷的方法

有效

• 申請號: 201310287325.8
• 申請日: 2013-07-09
• 公開（公告）號: CN103351419A
• 公開（公告）日: 2013-10-16
• 發明（設計）人: 張俏;曹愛蘭;朱愛華;史文靜;杜文娟
• 申請（專利權）人: 陜西中藥研究所
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00;C07H15/203;C07H1/08
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 汪人和

技術領域

本發明屬于天然產物提取分離技術領域，具體涉及一種兩步法同時制備長梗冬青苷和紫丁香苷的方法。

背景技術

救必應為冬青科植物鐵冬青Ilex?rotunda?Thunb.的干燥樹皮，始載于《嶺南采藥錄》，又名白木香、羊不吃、白沉香等。鐵冬青生長于山下疏林或溝、溪邊，分布于江蘇、安徽、浙江、江西、福建、臺灣、湖南、廣東、廣西、云南，為我國南方民方常用草藥。具有清熱解毒，利濕止痛的功效，常用于治療暑濕發熱，咽喉腫痛，濕熱瀉痢，脘腹脹痛，風濕痹痛，濕疹，瘡癤，跌打損傷。

在救必應較多的活性成分中，尤以長梗冬青苷和紫丁香苷含量較高且活性突出。長梗冬青苷又叫具棲冬青苷、救必應甲素，是五環三萜類化合物。分子式C₃₆H₅₈O₁₆，分子量658.86，具有清熱解毒，消腫止痛。用于感冒，扁桃體炎，咽喉腫痛，急性胃腸炎，風濕骨痛；外用治跌打損傷，癰癤瘡瘍，外傷出血，燒燙傷。另有文獻報道其具有降總膽固醇和總脂的作用。紫丁香苷又叫丁香苷、刺五加苷B、祖師麻丙素、救必應乙素、救必應甲苷，是苯丙素類化合物，分子式C₁₇H₂₄O₉，分子量372.36，微溶于冷水，稍溶于丙酮，溶于熱水、甲醇、乙醇，幾乎不溶于乙醚、苯、氯仿，具有抗炎、鎮痛和抗腫瘤作用，常用于止血和抗肝毒藥。

目前，少有從救必應中同時快速提取長梗冬青苷和紫丁香苷兩個成分的報道。單一成分提取工藝較多，一般從救必應、刺五加、雪蓮藥材中提取純化得來，多是采用低碳醇或丙酮提取，純化也多采用萃取或大孔樹脂吸附后再硅膠柱分離，過程漫長且目標化合物損失較多，操作步驟繁多且有機試劑特別毒性試劑使用較多，對操作人員危害大，環境污染嚴重。

專利CN101307079公開了一種從鐵冬青中提取分離紫丁香苷的方法，是將藥材粉碎成細粉，用苯回流提取，將提取后的藥渣晾干，加入丙酮回流提取，濃縮提取液，靜置析出，用丙酮洗滌析出物，將析出物用丙酮-甲醇的混合溶液反復重結晶，最后再用甲醇重結晶，即可得到紫丁香苷的白色針晶。此法所用溶劑的毒性較大。

專利CN101033245公開了一種具棲冬青苷的制備方法及應用，是取救必應粗粉，用乙醇回流提取，獲得長梗冬青苷且純度為98％，但損失了紫丁香苷。

綜上所述，在提取分離長梗冬青苷和紫丁香苷的過程中，普遍存在長梗冬青苷和紫丁香的流失大、純化過程漫長、溶劑殘留毒性大、成本較高的問題。因此，有必要尋找一種既簡便又安全地提取純化長梗冬青苷和紫丁香苷的方法。

發明內容

為了克服上述現有技術的缺陷，本發明的目的在于提供一種兩步法同時制備長梗冬青苷和紫丁香苷的方法，該方法操作簡單、安全有效，制備的長梗冬青苷和紫丁香苷含量大，純度高。

本發明是通過以下技術方案來實現：

兩步法同時制備長梗冬青苷和紫丁香苷的方法，包括以下步驟：

1）按1g：6～18ml的料液比，向救必應藥材中加入體積分數為20～70%的乙醇水溶液，回流提取，收集提取液，濃縮至提取液濃度為0.10～0.25g/mL后，靜置，然后過濾，分別收集濾液和濾渣；

2）將濾渣干燥，得到長梗冬青苷粗品，將長梗冬青苷粗品純化后，得到長梗冬青苷；

3）將濾液通過大孔吸附樹脂進行柱層析分離，以乙醇-水體系作為洗脫劑進行梯度洗脫，收集體積分數為10～50%的乙醇水溶液的洗脫組分，對該洗脫組分濃縮、干燥，得到紫丁香苷粗品，將紫丁香苷粗品純化后，得到紫丁香苷。

步驟1）所述的回流提取次數為1～3次，每次30～120min。

步驟3）所述的大孔吸附樹脂的型號為NKA-II、XDA-1、NKA-9或JTY-1。

步驟3）所述的用體積分數為10～50%的乙醇水溶液的梯度洗脫，每個梯度洗脫1～5倍柱體積。

步驟2）和3）所述的純化采用重結晶或柱層析法對長梗冬青苷粗品及紫丁香苷粗品進行純化。

所述的重結晶采用的溶劑為甲醇、乙醇、丙酮或它們的水溶液。

所述的重結晶是將長梗冬青苷粗品或紫丁香苷粗品溶于所述的重結晶溶劑中，在50～70℃水浴中使其達到過飽和溶液，再在室溫下，靜置24～60h后析出結晶，將結晶過濾、干燥，得到純化的紫丁香苷或長梗冬青苷。