[發(fā)明專利]人工血小板PLGA-PEG-RGD在制備靜脈用全身性納米止血藥中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310282835.6
• 申請(qǐng)日: 2013-07-05
• 公開（公告）號(hào): CN103386114A
• 公開（公告）日: 2013-11-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 檀英霞;萬一千;宮鋒;季守平;李素波;王磊磊;高紅偉;宋錦文;張士坤;王穎麗;鮑國強(qiáng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院野戰(zhàn)輸血研究所
• 主分類號(hào): A61K38/06
• 分類號(hào): A61K38/06;A61K9/16;A61K47/48;A61P7/04;A61F17/00
• 代理公司: 北京尚誠知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11322
• 代理人: 魯兵

1.一種PLGA-PEG嵌段共聚物負(fù)載RGD的人工血小板PLGA-PEG-RGD，是由高分子聚合物聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)連接聚乙二醇(PEG)再連接RGD得到的。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人工血小板PLGA-PEG-RGD，其特征在于：其分子結(jié)構(gòu)式如式I所示，

???(式I)

其中，x代表PLGA中乳酸的個(gè)數(shù)，x＝233-400；y代表PLGA中羥基乙酸的個(gè)數(shù)，y＝233-400；n代表聚乙二醇的(CH₂-CH₂-O)片段的個(gè)數(shù)，n＝20-134。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的人工血小板PLGA-PEG-RGD，其特征在于：所述PLGA型號(hào)優(yōu)選為Resomer503H(50∶50?lactic?to?glycolic?acid?ratio，Mw＝25kDa)；PEG型號(hào)優(yōu)選為異官能團(tuán)聚乙二醇(NH₂-PEG-COOH，Mw＝3400Da)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的人工血小板PLGA-PEG-RGD，其特征在于：所述人工血小板PLGA-PEG-RGD為納米顆粒。

5.一種制備權(quán)利要求1或2或3或4所述人工血小板PLGA-PEG-RGD的方法，包括以下步驟：

步驟一：PLGA-NHS的合成

根據(jù)以下化學(xué)方程式，將端羧基的PLGA(Resomer503H)和NHS合成活化酯PLGA-NHS；

式中x、y的限定與權(quán)利要求1相同；

步驟二：PLGA-PEG嵌段共聚物PLGA-PEG-COOH的合成

將活化酯PLGA-NHS和異官能團(tuán)修飾的聚乙二醇(NH₂-PEG-COOH)通過酰胺鍵連接得到端羧基的PLGA-PEG的嵌段共聚物PLGA-PEG-COOH；

式中n的限定與權(quán)利要求1相同；

步驟三：PLGA-PEG-NHS的合成

根據(jù)以下化學(xué)方程式，將PLGA-PEG嵌段共聚物PLGA-PEG-COOH的端羧基在EDC作用下與NHS反應(yīng)得到相應(yīng)的活化酯PLGA-PEG-NHS；

步驟四：PLGA-PEG-RGD的合成

根據(jù)以下化學(xué)方程式，將活化酯PLGA-PEG-NHS與RGD三肽(精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸，Arg-Gly-Asp)的端氨基在堿性條件下對(duì)接得到PLGA-PEG-RGD；

步驟五：納米顆粒的制備和收集

納米微球的制備方法為：將步驟四制備的PLGA-PEG-RGD溶于可以與水混溶的溶劑，在超聲作用下將得到的高分子溶液緩慢滴加入純水溶液中，在室溫下攪拌揮發(fā)至形成懸濁液，再滴加聚丙烯酸溶液(1g/100ml)，有絮狀沉淀析出，靜置，離心，納米顆粒固體再用蒸餾水洗滌三次，用該固體配制溶度為5-25mg/mL(優(yōu)選為10mg/mL)的水溶液，用液氮快速冷凍，冷凍干燥得到粉體納米顆粒。

6.一種靜脈用全身性納米止血藥，其活性成分為權(quán)利要求1或2或3或4所述的人工血小板PLGA-PEG-RGD，為靜脈注射液，用生理鹽水或PBS將PLGA-PEG-RGD納米顆粒分散后形成。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的靜脈用全身性納米止血藥，其特征在于：納米微球的分散包括以下過程：用生理鹽水(0.9％NaCl溶液)或PBS(配方：1.75mM?KH₂PO₄，Na₂HPO₄，10.06mM?NaCl，2.68mM?KCl，pH7.2-7.4)懸浮納米微球至其濃度為5-25mg/mL，并超聲分散(200-300瓦、60-120min)，得到納米微球的分散液。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的靜脈用全身性納米止血藥，其特征在于：分散液中納米微球濃度優(yōu)選為20mg/mL，超聲分散優(yōu)選為250瓦下超聲60min。

9.權(quán)利要求1或2或3或4所述人工血小板PLGA-PEG-RGD在制備針對(duì)全身性大失血及內(nèi)出血的靜脈用止血藥中的應(yīng)用。

10.包含權(quán)利要求1至4任一所述人工血小板PLGA-PEG-RGD或權(quán)利要求6至8任一所述的靜脈用全身性納米止血藥的急救包。