[發(fā)明專利]膝溝藻毒素GTX2,3完全抗原及單克隆抗體的制備

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310279284.8
• 申請(qǐng)日: 2013-07-04
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103319591A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-09-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何培民;賈睿;張洋;蔡春爾;崔峰;楊欣欣;邱軍強(qiáng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海海洋大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K14/765
• 分類號(hào): C07K14/765;C07K1/107;C07K16/14
• 代理公司: 上海伯瑞杰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31227
• 代理人: 吳瑾瑜

1.膝溝藻毒素GTX2,3完全抗原的制備方法，其特征在于，步驟包括：

將膝溝藻毒素GTX2,3溶液與含有BSA的pH為7.4～7.8的緩沖液混合，加入甲醛，避光于25～30℃下，振蕩65～80小時(shí)；反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液在pH值為7.0～7.4、0.01mol/L的緩沖液中透析65～75小時(shí)，收集濃縮液。

2.權(quán)利要求1所述膝溝藻毒素GTX2,3完全抗原的制備方法，其特征在于，反應(yīng)體系中，膝溝藻毒素GTX2,3與BSA蛋白以及甲醛的質(zhì)量比為1：5～50：0.2～0.5。

3.權(quán)利要求1或2所述膝溝藻毒素GTX2,3完全抗原的制備方法，其特征在于，所述的膝溝藻毒素GTX2,3與BSA蛋白以及甲醛的質(zhì)量比為1：10～20：0.25～0.35。

4.權(quán)利要求1所述膝溝藻毒素GTX2,3完全抗原的制備方法，其特征在于，所述的含有BSA的緩沖液為磷酸緩沖液，pH=7.6；所述的透析用緩沖液為磷酸緩沖液，pH=7.2。

5.權(quán)利要求3所述膝溝藻毒素GTX2,3完全抗原的制備方法，其特征在于，所述的含有BAS磷酸緩沖液和透析用磷酸緩沖液濃度為0.01mol/L。

6.權(quán)利要求1所述膝溝藻毒素GTX2,3完全抗原的制備方法，其特征在于，以50～65rpm速度振蕩。

7.一種膝溝藻毒素GTX2,3完全抗原，其特征在于，通過(guò)權(quán)利要求1～6任一項(xiàng)所述的方法所制備。

8.權(quán)利要求7所述膝溝藻毒素GTX2,3完全抗原用于制備GTX2,3單克隆抗體。

9.膝溝藻毒素GTX2,3單克隆抗體的制備方法，其特征在于，步驟包括：將權(quán)利要求6所述膝溝藻毒素GTX2,3-BSA完全抗原與弗氏佐劑混合，然后注射小鼠；連續(xù)免疫5次。

10.權(quán)利要求9所述膝溝藻毒素GTX2,3單克隆抗體的制備方法，其特征在于，步驟為：（1）GTX2,3-BSA完全抗原與弗氏完全佐劑混合，然后注射小鼠一次；（2）12～15天后，用GTX2,3-BSA完全抗原與弗氏不完全佐劑混合注射小鼠，重復(fù)四次，每次注射間隔12～15天。