[發(fā)明專利]一種HPLC測(cè)定雙氫青蒿素原料或制劑中雜質(zhì)A含量的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310275314.8
• 申請(qǐng)日: 2013-07-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103308626A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-09-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳偉;薛春雅;王小平;院月琴;倪秀珍;貴曉霞;錢(qián)佳旦
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江華立南湖制藥有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
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• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥物分析化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，涉及對(duì)抗瘧藥雙氫青蒿素原料或制劑質(zhì)量進(jìn)行分析的方法，具體涉及用高效液相色譜法分離雙氫青蒿素的降解雜質(zhì)并進(jìn)行含量檢測(cè)的方法。

背景技術(shù)

雙氫青蒿素的化學(xué)名為：(3R,5aS,6R,8aS,9R,12S,12aR)-八氫-3,6,9-三甲基-3,12-橋氧-12H-吡喃并[4,3-j]-1,2-苯并二塞平-10(3H)-醇，結(jié)構(gòu)式如式Ⅰ所示：

雙氫青蒿素是1973年中國(guó)科學(xué)家成功從青蒿提取物中分離出一種全新的抗瘧有效單體——青蒿素，是目前為止最有效的抗瘧藥，由于單藥使用時(shí)間長(zhǎng)了以后會(huì)引起抗藥性，研制抗瘧藥復(fù)方被公認(rèn)為有效的重要途徑。雙氫青蒿素哌喹片是由中國(guó)首創(chuàng)的復(fù)方抗瘧藥，經(jīng)臨床試驗(yàn)證明：能迅速控制瘧疾的臨床癥狀，它能在很短的時(shí)間內(nèi)殺滅大量瘧原蟲(chóng)，降低了瘧原蟲(chóng)對(duì)產(chǎn)生耐藥性的風(fēng)險(xiǎn)，作為青蒿素的第三代產(chǎn)品,被國(guó)際WHO推薦使用。

大量研究發(fā)現(xiàn)，雙氫青蒿素哌喹片在儲(chǔ)存過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生部分雜質(zhì)，其中包括(2R)-2-[(4R)-4-Methyl-2-oxo-3-(3-oxobutyl)cyclohexyl]propanal(本發(fā)明中簡(jiǎn)稱雜質(zhì)A)，雜質(zhì)A的結(jié)構(gòu)式如式Ⅱ所示：

由于現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)采用薄層色譜法只能檢測(cè)雜質(zhì)的總量，因此實(shí)現(xiàn)雙氫青蒿素及其各雜質(zhì)間的有效分離對(duì)測(cè)定雙氫青蒿素原料或制劑中雙氫青蒿素和各雜質(zhì)的量具有重大意義。通過(guò)檢索發(fā)現(xiàn)，目前國(guó)內(nèi)外尚沒(méi)有文獻(xiàn)報(bào)道用高效液相色譜法分離雙氫青蒿素的降解雜質(zhì)并進(jìn)行含量測(cè)定的方法。

發(fā)明內(nèi)容

鑒于現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)研究，提供一種高效液相色譜測(cè)定雙氫青蒿素原料或制劑中雜質(zhì)A含量的方法，以便更好地保證雙氫青蒿素原料或制劑的質(zhì)量。

本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種HPLC測(cè)定雙氫青蒿素原料或制劑中雜質(zhì)A含量的方法，所述的雜質(zhì)A的化學(xué)結(jié)構(gòu)式Ⅱ所示，其中高效液相色譜的流動(dòng)相為體積比（45-55）：5：（40-50）的乙腈-甲醇-水，檢測(cè)器為紫外檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)是210nm～221nm。

優(yōu)選地，上述的HPLC測(cè)定雙氫青蒿素原料或制劑中雜質(zhì)A含量的方法，其中色譜柱的填料為十八烷基硅烷鍵和硅膠。

優(yōu)選地，上述的HPLC測(cè)定雙氫青蒿素原料或制劑中雜質(zhì)A含量的方法，其中HPLC測(cè)定雙氫青蒿素原料或制劑中雜質(zhì)A含量時(shí)色譜柱的柱溫是8℃～12℃。

進(jìn)一步優(yōu)選地，上述的HPLC測(cè)定雙氫青蒿素原料或制劑中雜質(zhì)A含量的方法，其中HPLC測(cè)定雙氫青蒿素原料或制劑中雜質(zhì)A含量時(shí)色譜柱的柱溫是10℃。

再進(jìn)一步優(yōu)選地，上述的HPLC測(cè)定雙氫青蒿素原料或制劑中雜質(zhì)A含量的方法，所述的流動(dòng)相為體積比50：5：45的乙腈-甲醇-水。

再進(jìn)一步優(yōu)選地，上述的HPLC測(cè)定雙氫青蒿素原料或制劑中雜質(zhì)A含量的方法，其中所述流動(dòng)相的流速為0.5～1.6ml/min。

再進(jìn)一步優(yōu)選地，上述的HPLC測(cè)定雙氫青蒿素原料或制劑中雜質(zhì)A含量的方法，其中所述流動(dòng)相的流速為lml/min。

再進(jìn)一步優(yōu)選地，上述的HPLC測(cè)定雙氫青蒿素原料或制劑中雜質(zhì)A含量的方法，其中所述的紫外檢測(cè)器所用的檢測(cè)波長(zhǎng)是210nm。

再進(jìn)一步優(yōu)選地，上述的HPLC測(cè)定雙氫青蒿素原料或制劑中雜質(zhì)A含量的方法，其中雙氫青蒿素原料或制劑樣品供試溶液按如下方式配制：雙氫青蒿素原料或制劑細(xì)粉適量，用乙腈溶解，配制成lml含雙氫青蒿素5-10mg的樣品溶液。

再進(jìn)一步優(yōu)選地，上述的HPLC測(cè)定雙氫青蒿素原料或制劑中雜質(zhì)A含量的方法，其中雙氫青蒿素原料或制劑樣品供試溶液的進(jìn)樣量為10-100μl。

再進(jìn)一步優(yōu)選地，上述的HPLC測(cè)定雙氫青蒿素原料或制劑中雜質(zhì)A含量的方法，其中雙氫青蒿素原料或制劑樣品供試溶液的進(jìn)樣量為10-20μl。

本發(fā)明涉及的檢測(cè)方法能夠有效測(cè)定雙氫青蒿素原料或制劑中的有關(guān)物質(zhì)，尤其可以很好地分離雜質(zhì)A并測(cè)定其含量，方法簡(jiǎn)便，分析靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

附圖說(shuō)明

圖1為空自溶液的HPLC色譜圖,圖中縱坐標(biāo)為mAU，橫坐標(biāo)為min，下同。

圖2為磷酸哌喹的HPLC色譜圖（磷酸哌喹的保留時(shí)間為1.834）。

圖3為雜質(zhì)A的HPLC色譜圖（雜質(zhì)A的保留時(shí)間為5.357）。