[發明專利]烏骨藤皂苷A及其制備方法

在審

• 申請號: 201310274412.X
• 申請日: 2013-06-28
• 公開（公告）號: CN104250281A
• 公開（公告）日: 2014-12-31
• 發明（設計）人: 金顯友;楊永安;朱海亮;季浩
• 申請（專利權）人: 江蘇天晟藥業有限公司
• 主分類號: C07J71/00
• 分類號: C07J71/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種具有抗腫瘤活性的烏骨藤皂苷A的制備方法及其應用，屬于醫藥領域范疇。

背景技術

一直以來，癌癥被認為是人類的“頭號殺手”，被稱為不治之癥。2008年全球癌癥新發病例1300萬，死亡760萬，每8個死亡病例中就有1例癌癥患者。WHO警告稱，如不采取有效措施，照此趨勢發展，到2030年全球將有2600萬新增癌癥病例，死亡例數將躍至1700萬。

烏骨藤，又名通關藤、通光藤、通關散、通光散，是蘿藦科(Asclepiadaceae)植物通關藤(Marsdenia?tenacissima(Roxb.)Wight?et?Arn.)的藤莖。主要產于云南、貴州等西南地區，始載于《滇南本草》。烏骨藤含有皂苷、生物堿、有機酸、多糖、樹脂及色素等多種化學成分，它的主要藥理活性有抗腫瘤、免疫調節等作用。隨著對烏骨藤化學成分研究的深入，逐漸明確烏骨藤中起抗癌作用的是一類具有C₂₁-甾體皂苷母核的皂苷成分，其機理為作用于腫瘤細胞防止分裂，抑制腫瘤細胞增殖，促進腫瘤細胞分化。

目前，國內市場上由烏骨藤單味中藥開發出的中成藥是消癌平，包括注射液、片劑、膠囊、口服液等多種劑型，這些制劑均具有一定的抗癌療效，對胃癌、肝癌、肺癌、食道癌等多種腫瘤具有確切的療效，在臨床上已得到較廣泛的應用，說明烏骨藤具有一定的抗腫瘤活性。由于消癌平開發于上世紀90年代，時間較早，當時的技術相對落后，再加上烏骨藤藥材中化學成分很復雜，所以諸多消癌平制劑中均未能明確其中真正的抗腫瘤活性成分。

本發明的目的是提供一種結構明確、療效確切的烏骨藤皂苷A。烏骨藤皂苷A是從中藥烏骨藤中通過分離純化方法制備得到，具有結構明確，活性高，毒副作用小的特點。通過對烏骨藤皂苷A含量的控制可大大提高烏骨藤制劑的安全性、穩定性和可控性。同時由于其含量高，能大大降低原制劑的使用劑量，減少其他雜質藥物對機體的刺激性。能更好的保障烏骨藤皂苷制劑的臨床療效，使抗腫瘤中藥烏骨藤發揮更大社會價值并得到更好的利用。

在專利申請號為CN200910184788.5的名為《具一種烏骨藤皂苷組合物及其制備方法》專利中，公開了一種由烏骨藤皂苷組合物及其制備方法，沒有明確其中的某一活性成分及其化學結構，與本發明提供的化學成分及結構明確的烏骨藤皂苷A具有明顯的不同。在專利申請號為CN200810059047.X的名為《具有抗腫瘤作用的烏骨藤碳-21甾體皂苷混合物》專利中，雖然公開了烏骨藤苷A、B、C、D、K，但該專利工藝主要采用硅膠柱層析法、Rp-18柱層析法、色譜制備法，其使用材料昂貴，制備成本高，而且操作復雜，難以進行產業化生產，只適用于少量樣品的制備。

本發明的優勢在于克服了以往工藝的不足，提供了一種結構明確、高含量的烏骨藤皂苷A；本發明還提供了高含量的烏骨藤皂苷A及其藥物組合物的制備方法，臨床用于腫瘤的治療。本發明提供的烏骨藤皂苷及其藥物組合物的制備方法重復性好，可適用于生產放大，易于推廣，具有很強的實用性。

發明內容

本發明的目的在于克服傳統工藝的不足，提供一種具有良好抗腫瘤活性的高含量的烏骨藤皂苷A，采用高效液相色譜法測定，含量60％～99.8％，其結構式如下：

本發明的另一目的在于提供一種烏骨藤皂苷A及其藥物組合物的制備方法，臨床用于腫瘤的治療。

根據本發明的比較優選的實施方案，提取烏骨藤皂苷H的制備方法包括如下步驟：

(1)取烏骨藤藥材，加適量水加熱回流提取，合并提取液；

(2)提取液過濾，濾液上大孔樹脂柱，上柱完成后，加水洗脫去除大極性雜質后，改用乙醇洗脫，至洗脫液中無烏骨藤皂苷A，收集洗脫液；

(3)洗脫液減壓濃縮成稠膏，加入適量有機溶劑，溶解，過濾，殘渣棄去，冷卻，加入微量純度大于98％的烏骨藤皂苷A結晶作為晶種，靜置結晶，過濾，干燥，得類白色烏骨藤皂苷A粗品；

(4)取上述烏骨藤皂苷A粗品，加適量溶劑加熱回流溶解后，過濾，濾液冷卻，濾液上葡聚糖凝膠，上柱完成后，用甲醇-水洗脫，至洗脫液中無烏骨藤皂苷A，收集洗脫液；

(5)洗脫液合并濃縮至一定體積，冷卻，加入微量純度大于98％的烏骨藤皂苷A結晶作為晶種，靜置結晶，過濾，干燥，得含量60～99.8％的烏骨藤皂苷A。

上述步驟(1)提取溶劑的用量為藥材量的6～10倍(m/V)，優選為8倍量；提取次數為1～3次，優選2次；提取時間為1～3小時，優選為2小時。