[發(fā)明專利]少花龍葵根組織培養(yǎng)方法建立

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310272723.2
• 申請(qǐng)日: 2013-07-02
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104273026A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-01-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 不公告發(fā)明人
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物基因工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及少花龍葵根組織培養(yǎng)方法建立。

背景技術(shù)

少花龍葵(Solarium?photeinocarpum?Nakamuraet?Odashima)別名白花菜、扣子草等，是茄科(Solanaceae)茄屬多年生草本植物，分布于我國(guó)大部分地區(qū)、多生長(zhǎng)在果園、田邊、村邊路旁等。少花龍葵主治痢疾、高血壓和黃疸等。外治皮膚濕毒、烏皰和老鼠咬傷等。它不僅具有重要的藥用價(jià)值，同時(shí)也可以食用，所以越來(lái)越受到人們的關(guān)注。目前人們已經(jīng)建立少花龍葵子葉、龍葵葉、原生質(zhì)體和幼莖表皮細(xì)胞再生體系，曾祥偉等利用野生少花龍葵種子萌發(fā)后長(zhǎng)出的無(wú)菌苗子葉作為外植體，通過(guò)在MS培養(yǎng)基中添加一定濃度的6-BA和NAA誘導(dǎo)分化出胚狀體，再通過(guò)對(duì)幼苗誘導(dǎo)生根最后培養(yǎng)成完整植株。劉連芬等利用龍葵幼苗的葉片經(jīng)表面消毒后制備外植體，在MS培養(yǎng)基中添加0.5mg/L?6BA和2?mg/L?IAA能夠誘導(dǎo)出芽，在MS培養(yǎng)基中添加0.05mg/L?6BA和1?mg/L?IAA能夠誘導(dǎo)出根。王光遠(yuǎn)等利用從龍葵葉肉細(xì)胞分離出的原生質(zhì)體進(jìn)行組織培養(yǎng)，最后再生成完整的植株。何奕昆等利用龍葵表皮及皮下1-6層細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料，通過(guò)添加一定濃度的6-BA和2,4-D，能夠誘導(dǎo)出幼芽。但截至目前為止未見(jiàn)根組織培養(yǎng)方法相關(guān)研究。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的少花龍葵根組織培養(yǎng)方法是首先利用15%次氯酸鈉溶液消毒種子，時(shí)間15分鐘，然后在超凈工作臺(tái)用無(wú)菌水清洗5次，把消毒后的種子放置在MS基本培養(yǎng)基上，25℃光照培養(yǎng)，待培養(yǎng)20天后在超凈工作臺(tái)取無(wú)菌苗的根，用無(wú)菌水洗去瓊脂后切成1-2cm數(shù)段，作為外植體，放置誘芽培養(yǎng)基培養(yǎng)，該培養(yǎng)基配方是在MS基本培養(yǎng)基中添加1mg/L?6BA??、0.25?mg/L?TDZ?和0.2?mg/L?IAA。待幼芽長(zhǎng)到2-3cm時(shí)切下，放置在生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基配方是在MS基本培養(yǎng)基添加0.5mg/L?NAA；待幼苗的根長(zhǎng)到3-4cm時(shí)，即可煉苗移栽。

本發(fā)明的目的在于提供一種少花龍葵根組織培養(yǎng)方法。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明第一方面提供了一種少花龍葵種子的消毒方法。?

本發(fā)明的第二個(gè)方面提供了少花龍葵根誘芽培養(yǎng)基的配方。

??本發(fā)明的第三個(gè)方面提供了芽誘導(dǎo)生根培養(yǎng)基的配方。

??關(guān)于少花龍葵根組織培養(yǎng)方法，國(guó)內(nèi)外至今未見(jiàn)報(bào)道。本發(fā)明首先利用15%次氯酸鈉溶液消毒種子，然后利用培養(yǎng)20天后無(wú)菌苗的根，制備外植體，進(jìn)行誘芽培養(yǎng)，待芽長(zhǎng)到2-3cm時(shí)切下來(lái)，放置在生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)，待幼苗的根長(zhǎng)到3-4cm時(shí)，即可煉苗移栽。